Определение коллагена на основе предварительного гидролиза

Сторонники второго подхода пытаются взглянуть на процесс развития политической науки с другой стороны (как бы изнутри), а именно под углом зрения смены гос­подствовавших в ней методов исследования политики.

В рамках данного подхода в процессе конституирования политологии принято выделять три этапа: традиционный (последняя четверть XIX в.— 1930-е годы); бихевиоральный (1930 — 1970-е годы); постбихевиоральный (с 1970-х годов по настоящее время).

Первый из этих этапов называют традиционным не случайно:между ним и предшествующим периодом развития политических зна­ний существует глубокая и органическая связь. Прежде всего она за­ключается в том, что на этом этапе еще господствуют традиционные методы исследования политики: философский (универсализм), юриди­ческий (легализм) и исторический (историцизм.На их основе создава­лись универсальные теории (или теории общего уровня), которые продолжали занимать доминирующее положение в науке.

Несмотря на разнохарактерность этих теорий, можно выде­лить в них две общие черты. Первая — это нормативистский, цен­ностно ориентированный характер, который проявляется в том, что в таких теориях всегда присутствуют четко выраженная этическая, идеологическая позиция автора и соответствующие этому субъек­тивному идеалу предписания, как должно быть. Вторая черта -умозрительность, оторванность от реальной жизни.

Вместе с тем традиционный этап с самого начала нес в себе зачатки того, что принципиальным образом изменило лицо политического анализа на последующем этапе. Именно в это время по­степенно сложилось новое методологическое течение — реализм. Критикуя господствовавшие дотоле методы, его приверженцы заявили о том, что политические знания могут претендовать на научность только в том случае, если они, во-первых, отражают реальную по­литическую жизнь, а, во-вторых, лишены субъективизма. Установки реализма получили свое воплощение в двух новых методах анализа политики: институционализме и бихевиорализме.

Выделив в качестве главного объекта исследования полити­ческие институты (законодательные, исполнительные, судебные органы государственной власти, политические партии, избира­тельные системы и т.д.), ученые-институционалисты сосредото­чили свое внимание не на том, как должнафункционировать политическая система, а на детальном описании того, как имен­но это происходит в действительности. Наибольшее распространение институционализм получил в Западной Европе.

Бихевиоралисты также обратились к изучению реальной поли­тической жизни, но в качестве таковой они провозгласили наблю­даемое политическое поведение людей. Родиной бихевиорализма стали США, где в 1908 г. вышла книга Артура Бенти «Процесс управления», в которой он фактически сформулировал исходные принципы нового метода. По мнению А. Бенти, чтобы новая полити­ческая наука была реалистичной, она должна изучать то, что есть, а не то, что должно быть. Поэтому ей следует обратиться к изучению, во-первых, политического поведения, как главной реальности политики, а, во-вторых,— к изучению различных групп, как главных действующих лиц в политике.

Этот призыв был воспринят в полной мере представителями так называемой чикагской школы под руководством Тэрстоуна и Мэрриама, провозгласивших актуальность изучения человеческого поведения в институтах, группах и политическом процессе в целом.

Работы Тэрстоуна, Мэрризма, а чуть позже и Лассуэлла заложили фундамент нового, бихевиоралистского, направления в американской, а затем и в мировой политологии, задав вектор ее развития уже в послевоенный период.

Бихевиоралисты пошли на более решительный, чем институционалисты, разрыв с прежними методами исследования политики, совершив своего рода методологическую революцию.

Исходными принципами бихевиорализма стали следующие.

Первое. Объектом исследования политики должно быть наблюдаемое полити­ческое поведение человека, а также внутренние мотивы этого по­ведения. В связи с этим научную ценность имеют не теоретические рассуждения, а эмпирические факты, обработанные соответствую­щим образом.

Второе. Необходима широкая интеграция политологии с другими науками, широкое применение при анализе политики методов других наук, в том числе естественных.

Третье. Получаемые знания должны быть верифицируемы, условием научности провозглашается подтверждение или опровер­жение сделанных выводов.

Четвертое. Главная задача политической теории состоит в том, чтобы объяснить поведение людей, которое наблюдали ис­следователи.

Следует отметить, что претензии бихевиоралистов в значи­тельной степени были реализованы: объектом исследования политологии действительно стала реальная политическая жизнь, что в значительной мере способствовало преодолению в ней схоластического теоретизирования; благодаря интеграции с дру­гими науками существенно расширилось поле политических ис­следований; быстрее стал накапливаться фактологический мате­риал.

Однако недостатки бихевиорализма были прямым продолжением его достоинств.

Первый и главный из них — «гиперфактуализм»: бесконечное накопление фактов и отсутствие интерпретации, систематизация результатов проводимых многочисленных исследований. Бихевиорализм сам по себе не имел методологии перехода от обобщении первого уровня к обобщениям (теориям) среднего и высшего (общего) уровня.

Суть второго недостатка была обозначена как «империализм в методологии". Увлечение бихевиоралистов математическими мето­дами и приемами в конечном итоге привело к парадоксальной си­туации, когда методы стали диктовать ученому что исследовать. Та сфера социальной действительности, которая не поддавалась коли­чественному измерению,по сути дела не могла быть объектом анализа в рамках би­хевиорализма.

И, наконец, третий упрек бихевиорализму состоял в том, что он не смог реализовать одну из важнейших своих претензий: соз­дать нейтральную науку путем разделения фактов и ценностей. В действительности же, замкнувшись на описании фактов, сторонники бихевиорализма выступали носителями идеологии социального консерватизма. В результате политическая наука проявила недаль­новидность и слепоту. Ей не удалось предсказать целым ряд кризи­сов, в том числе в 60-е годы: кризис городов, расовые конфликты, рост насилия и нищеты и др.

Критика бихевиорализма велась, с двух сторон: во-первых, традиционалистами, а, во-вторых — его же приверженцами по ме­ре осознания ими его ограниченности. Пытаясь преодолеть недо­статки бихевиорализма, его сторонники искали пути выхода из возникших затруднений в обращении к новым, дополняющим его методам исследования политики. В числе этих методов следует на­звать прежде всего системный подход, предложенный Д. Истоном, функциональный анализ, разработанный Г. Алмондом, кибернети­ческий подход К. Дойча и другие.

Тем не менее предложенные методы так и не смогли до конца решить вопрос формирования такого политического знания, которое было бы лишено полностью элеменов субъективизма.

Выход из кризиса был предложен в 1969 г. на заседании Аме­риканской ассоциации политической науки (ААПН) видным ученым, одним из бывших приверженцев бихевиоралистического метода Давидом Истоном, заявившем о необходимости переориентации политической науки и о наступлении нового этапа ее развития: постбихевиорализма. Отмечая несомненные заслуги и достижения бихевиорализма, подтверждая приверженность в исследовании политики реальным фактам, Истон решительно выступил против созерцательного характера политической науки. На новом этапе, по его мнению, политология должна была стать наукой действия: выявлять реальные нужды человечества в кризисные времена и защищать гуманные ценности цивилизации. Данный призыв свидетельствовал о том, что даже последовательные бихевиоралисты признали неизбежность ценностных (т.е. идеологических) установок в системе политического знания, а потому он стал одновременно фактом оправдания тех методов, которые допускают интерпритационность как элемент осмысления политической реальности.

Определение коллагена на основе предварительного гидролиза

Для проведения анализа необходимо мясо массой 4 г вносят в колбу Кьельдаля вместимостью примерено 100 см³ со шлифом для присоединения обратного холодильника. К навеске добавляют 7 см³ воды, 10 см³ соляной кислоты молярной концентрацией 12 моль/дм³ и 0,7 г хлорида олова (II).

После этого к колбе присоединяют пришлифованный шариковый холодильник и включают воду. Нагревание ведут на воздушной или песчаной бане. С момента закипания жидкость нагревают ровно 7 ч, после чего плитку выключают и отставляют от колбы. Ещё тёплую колбу отсоединяют от холодильника и содержимое переносят, смывая дистиллированной водой, в мерную колбу вместимостью 100 см³. Исходную колбу несколько раз ополаскивают водой.

Чтобы ускорить процесс гидролиза проводят в автоклаве. Навеску мяса массой 4 г вносят в ампулу вместимостью 25 см³ через расширенную часть горлышка. К навеске добавляют 7 см³ воды, 10 см³ концентрированной соляной кислоты и 0,7 г хлорида олова (II). Ампулы 112-114 ⁰С на 3,5 ч, после чего их можно хранить длительное время.

В мерную колбу переносят содержимое ампулы вместимостью 100 см³, остатки смывают дистиллированной водой.

Содержимое мерной колбы независимо от способа гидролиза нейтрализуют раствором гидроксида натрия молярной концентрацией 6 моль/дм³, а затем доводят насыщенным раствором карбоната натрия до рН 8,0 – 8,2. После образования белого осадка начинают контролировать рН, используя рН-метр со стеклянным электродом или универсальный индикатор и фенолфталеин.

По последнему способу из колбы отбирают тонкой стеклянной палочкой 1 каплю жидкости и помещают её на пластинку из молочно-белого стекла. Добавляют несколько капель дистиллированной воды и 1 каплю универсального индикатора. После того как по универсальному индикатору рН жидкости будет близок к 7,5, добавляют несколько кубических сантиметров раствора карбоната натрия. Обработка считается законченной, если капля раствора, смешенная с водой, окрасится в чуть заметный розовый цвет.

Колбу с жидкостью быстро охлаждают, объём доводят до метки дистиллированной водой и оставляют в покое в течении 30 мин. Затем осадок отфильтровывают через плотный бумажный фильтр на воронке Бюхнера при слабом разрежении.

Если фильтр мутный, его вторично фильтруют через тот же самый фильтр. Фильтрат светло-жёлтого цвета должен быть совершенно прозрачным. Одновременно гидролизуют, а заем нейтрализуют и фильтруют несколько проб.

В пробирки отмеряют пипетками по 1 см³ растворов в указанном порядке: исследуемый фильтрат, раствор сульфата меди молярной концентрацией 0,01 моль/дм³, раствор гидроксида натрия молярной концентрацией 2,5 моль/дм³, раствор пероксида водорода массовой долей 6 %. Одновременно проводят три контрольных опыта, в которых исследуемый фильтрат заменяют 1 см³ дистиллированной воды.

Периодически встряхивая, в течении 5 мин растворы в пробирках перемешивают. Затем пробирки помещают на водяную баню при 80 0С на 5 мин, часто и энергично встряхивая их. При этом пробирки должны быть глубоко погружены в воду. По окончании нагревания пробирки охлаждают на водяной бане со льдом и добавляют в каждую при перемешивании 4 см³ раствора серной кислоты молярной концентрацией 3 моль/дм³, а затем при сильном перемешивании 2 см³ раствора пара-диметиламинобензальдегида.

Пробирки помещают на водяную баню при 70 ⁰С на 16 мин, после чего охлаждают водопроводной водой (под краном) и измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре при длине волны 560 нм или фотоэлектроколориметре с зелёным светофильтром. Измерения сравнивают с контрольным опытом. Предварительно измеряют оптическую плотность 2-х контрольных растворов. Третий контрольный раствор служит запасным.

При построении калибровочного графика, растворы оксипролина концентрацией 0,5-25,0 мкг/см³ подвергают всем операциям согласно описанию метода, начиная с гидролиза, т.к. в процессе последнего некоторое количество оксипролина разрушается.

Рис. Калибровочный график для определения оксипролина:

Дата добавления: 2014-07-11; просмотров: 941; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!