Гистохимия

Методы гистохимии направлены на выявление тех или иных молекул в клетках и тканях, что позволяет изучать специализированные типы клеток, их изменения в норме и патологии. Существует множество гистохимических методов, многие – очень сложные, многоступенчатые и трудоемкие.

Пример:

Выявление ДНК по Фельгену

Реактивы:

1. Метиловый спирт.

2. 3N раствор HCl.

3. Реактив Шиффа.

4. 1N HCI.

Приготовление реактивов

1. 3N раствор HCl: 266,4 мл концентрированной HCl, до 1 литра — дистиллированная вода. Готовить в мерной колбе, хранить в холодильнике.

2. Реактив Шиффа.

3. Сернистая вода: 1,5 г —Na₂S₂O₅, 15 мл — 1N HCl, 300 мл — дистиллированной воды.

Ход реакции

1. Препарат фиксируют в метаноле 15 мин.

2. Опускают в подогретый до 37 °С раствор 3N раствор соляной кислоты и помещают в термостат при 37 °С на 20 — 25 мин.

3. Промывают в отработанном реактиве Шиффа из холодильника.

4. Помещают в чистый реактив Шиффа при 37 °С на 45 — 60 мин.

5. Промывают в сернистой воде 3 раза по 3 мин.

6. Промывают в дистиллированной воде.

7. Высушивают на воздухе и заключают под покровное стекло в заливочную среду.

Этот метод используют для окраски ядер клеток и метафазных хромосом.

Для каждой ткани существуют свои особенности фиксации, проводки, заливки и окраски. Очевидно, что изготовление срезов костной ткани и нервной различается. В качестве красителей используются самые разнообразные вещества, наиболее распространены анилиновые красители. Своеобразным вариантом красителя являются соли серебра, которые восстанавливаются в ходе окрашивания до металлического серебра, придающего окраску структурам.

Дата добавления: 2014-04-24; просмотров: 487; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!