Окраска по Граму

Читайте также:

Протокол санитарно-бактериологического исследования смыва с рук (с использованием демонстрационного материала).

День исследования	Материал для исследования	Ход исследования	Результат исследования
	Смыв с рук	Взятие смыва с рук стерильной увлажненной салфеткой и посев в среду Кесслера (МПБ + желчь + лактоза + генцианфиолетовый + поплавок) для обнаружения E. coli. Инкубация в термостате 44^оС 24 часа.
	-	Учет роста на среде Кесслера -(газообразование при 44⁰С). Пересев на среду Эндо.
	-	Учет роста красных колоний на среде Эндо. Приготовление мазка, окраска по Граму, микроскопия. Оксидазный тест.

Заключение:

ЗАНЯТИЕ №7

ТЕМА: Микрофлора воздуха, воды, почвы. Санитарно-бактериологическое исследование воды, воздуха. Фитопатогенные бактерии. Микрофлора лекарственного сырья и готовых лекарственных форм.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме.

2. Освоить методы оценки санитарного состояния воздуха, воды.

3. Ознакомиться с методикой определения микробной загрязненности лекарственного сырья и готовых лекарственных форм.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Микрофлора воздуха.

2. Показатели санитарного состояния воздуха. Методы определения микробного числа.

3. Микрофлора воды, источники ее загрязнения. Показатели санитарного состояния воды. Определение микробного числа воды.

4. Методы определения общих и термотолерантных колиформных бактерий.

5. Микрофлора почвы, показатели ее санитарного состояния.

6. Понятие об эпифитных и фитопатогенных микроорганизмах.

7. Ризосфера, микориза, роль для растений.

8. Инфекционные болезни растений, вызываемые фитопатогенными микроорганизмами, их проявление.

9. Способы заражения растений и пути распространения бактерий в пораженных растениях. Меры борьбы с бактериозами.

10. Источники и причины микробного загрязнения лекарственного растительного сырья и готовых лекарственных средств.

11. Признаки микробной порчи лекарственных форм и меры ее предупреждения.

12. Определение микробной загрязненности лекарственного растительного сырья.

13. Определение микробной загрязненности лекарственных средств и способы устранения их антимикробного действия.

14. Определение стерильности инъекционных растворов. Пирогены.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2002, стр. 51-53, 68-71.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 74-86, 87-100.

4. «Микрофлора растений. Фитопатогенные бактерии» Н.В. Железняк, 2009.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Разбор методов мембранной фильтрации и титрационного метода с использованием демонстрационного материала.

2. Демонстрация седиментационного метода определения микробного числа воздуха.

3. Определение микробной обсеменности таблеток.

День Материал для исследования Ход исследования Результат

Таблетки В стерильном физрастворе приготовить три десятикратных разведения (1:10, 1:100, 1:1000). Из последнего разведения взять 0,1 мл и посеять шпателем на чашку с МПА. Инкубация в термостате при 37⁰С 24 ч. Учет роста, подсчет выросших колоний, определение микробного числа.

Заключение:

Примечание: при определении микробного числа (количества микробов в 1 мл) полученное число колоний умножить на 10 и на степень разведения.

ЗАНЯТИЕ №8

ТЕМА: Итоговое занятие по теме «Морфология и физиология микроорганизмов. Санитарная бактериология».

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Международная классификация и таксономия микроорганизмов.

2. Основные морфологические формы бактерий.

3. Методы изучения морфологии и структуры бактерий. Виды микроскопического исследования.

4. Простые и сложные методы окраски. Виды сложных методов окраски.

5. Структура бактериальной клетки, обязательные и необязательные компоненты. Оболочка бактерий, ее строение. Цитоплазматическая мембрана, ее роль.

6. Строение клеточной стенки у Гр(+) и Гр(-) бактерий. Принцип и сущность окраски по Граму. Протопласт, сферопласт, L-формы бактерий.

7. Капсула бактерий, роль. Методы выявления капсул.

8. Споры, условия и механизм образования, значение спорообразования, методы обнаружения спор.

9. Жгутики, строение, роль. Методы изучения подвижности. Пили, их значение.

10. Цитоплазма и ее структуры, их назначение. Методы для обнаружения зерен волютина.

11. Нуклеоид, роль, методы обнаружения.

12. Извитые формы бактерий. Спирохеты, строение, классификация, методы изучения их морфологии.

13. Риккетсии, морфология, структура, особенности физиологии.

14. Хламидии, морфология, структура, циклы развития.

15. Микоплазмы, морфология, особенности строения.

16. Грибы, морфология, строение, классификация.

17. Метаболизм бактерий. Голофитный способ питания. Классификация бактерий по типам питания.

18. Механизмы питания.

19. Питательные среды, требования к ним, классификация сред.

20. Рост и размножение бактерий, механизм деления. Фазы размножения бактериальной популяции в жидкой среде.

21. Пигментообразование у бактерий, условия для этого процесса, классификация и значение пигментов.

22. Культуральные свойства бактерий. Методы выделения чистой культуры аэробных бактерий.

23. Дыхание у бактерий, типы биологического окисления. Брожение.

24. Методы культивирования анаэробов.

25. Ферменты бактерий. Свойства, классификация. Роль и значение ферментов.

26. Определение сахаролитических свойств, состав сред Гисса. Определение протеолитических свойств. Определение каталазной и оксидазной активности.

27. Микробные экосистемы и их компоненты (биоценоз, биотоп). Понятие об эковаре.

28. Влияние биологических факторов. Виды симбиоза.

29. Антагонизм, формы антагонизма.

30. Стерилизация, определение, методы.

31. Антисептика, определение, классификация антисептиков, требования к ним, механизмы действия.

32. Асептика, определение, назначение. Дезинфекция, определение, назначение. Виды дезинфекции.

33. Микрофлора тела человека.

34. Значение нормальной микрофлоры. Дисбактериоз, причины развития, лечение и профилактика.

35. Санитарно-показательные микробы, определение, свойства. Санитарно-бактериологическое исследование смыва с рук, цель и методика проведения.

36. Микрофлора воздуха. Показатели санитарного состояния воздуха. Методы определения микробного числа воздуха.

37. Микрофлора воды, источники загрязнения. Показатели санитарного состояния воды. Определение общего микробного числа воды.

38. Методы определения общих и термотолерантных колиформных бактерий.

39. Микрофлора почвы, показатели ее санитарного состояния.

40. Понятие об эпифитных и фитопатогенных микроорганизмах. Ризосфера, микориза, их роль для растений.

41. Инфекционные болезни растений, вызываемые фитопатогенными микроорганизмами, их проявление. Способы заражения растений и пути распространения бактерий в пораженных растениях. Меры борьбы с бактериозами.

42. Источники и причины микробного загрязнения лекарственного растительного сырья и готовых лекарственных средств. Признаки микробной порчи лекарственных форм и меры ее предупреждения.

43. Определение микробной загрязненности лекарственного растительного сырья.

44. Определение микробной загрязненности лекарственных средств. Способы устранения их антимикробного действия.

45. Определение стерильности инъекционных растворов. Пирогены.

ЗАНЯТИЕ №9

ТЕМА: Структура и функция системы иммунитета. Основные понятия иммунитета. Цитокины и интерлейкины. Развитие и дифференцировка Т- и В-лимфоцитов.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Уметь определить в мазках феномен розеткообразования Т-лимфоцитов с эритроцитами барана.

3. Знать принцип проточной цитометрии для оценки субпопуляции лимфоцитов.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

Система иммунитета, подсистемы, центральные и периферические органы.

Центральные понятия системы иммунитета: антигены, антитела, рецепторы, цитокины.

Определение понятия «иммунитет», феномены иммунитета, «иммунологическая память».

Виды иммунитета.

Цитокины, общие свойства, классификация.

Интерлейкины.

CD-антигены.

Т-лимфоциты, развитие и дифференцировка. Субпопуляции Т-лимфоцитов, их функции.

В-лимфоциты, развитие и дифференцировка. Функции В-лимфоцитов.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 8-20, 33-34, 40-41.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Демонстрация результатов проточной цитометрии для оценки субпопуляции лимфоцитов.

2. Микроскопия и зарисовка препарата с розеткообразованием.

ПРЕПАРАТ №1

Розеткообразование

Т-лимфоцитов с эритроцитами барана

Окраска по Романовскому-Гимзе

ЗАНЯТИЕ №10

Тема: Антигены. Антитела. Серологические реакции. Реакция преципитации.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Знать назначение и уметь ставить и учитывать реакцию кольцепреципитации с целью определения видовой принадлежности белка.

3. Уметь учитывать результаты реакции преципитации в агаре.

4. Уметь учитывать результаты опыта определения токсигенности микроорганизмов по демонстрационным чашкам.

5. Знать методы получения антитоксических и преципитирующих сывороток.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Антигены, определение, свойства, виды.

2. Инфекционные антигены, виды, характеристика.

3. Неинфекционные антигены, виды.

4. Система HLA-антигенов, роль в иммунитете.

5. Иммуноглобулины, определение, структура.

6. Классы иммуноглобулинов, характеристика.

7. Антитела, виды, механизмы действия.

8. Моноклональные антитела, получение, применение

9. Серологические реакции, общая характеристика, назначение.

10. Реакция преципитации, ингредиенты, цель постановки.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 34-40, 42-46, 126-127, 132-133.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр.104-407, 110-111.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка реакции кольцепреципитации с целью определения видовой принадлежности белка.

Ингредиенты: 1. Вытяжка из пятна крови.

2. Сыворотка, преципитирующая белок человека.

3. Сыворотка, преципитирующая белок курицы.

Ход работы: в пробирку №1 внести пипеткой 1 мл сыворотки, преципитирующей белок человека; осторожно по стенке наслоить такое же количество вытяжки. В пробирку №2 внести сыворотку, приципитирующую белок курицы, и также наслоить исследуемую вытяжку.

Полученный результат зарисовать в альбоме и сделать заключение о виде белка.

2. Демонстрация реакции преципитации в агаре и реакции преципитации в геле для определения токсигенности бактерий.

ЗАНЯТИЕ №11

Тема: Факторы естественного иммунитета. Фагоциты и фагоцитоз. Система комплемента. Серологические реакции: реакция связывания комплемента.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Знать назначение, уметь ставить и учитывать результаты реакции связывания комплемента для определения антител в сыворотке больного.

3. Знать назначение реакции гемолиза и ингредиенты этой реакции.

4. Уметь оценить и правильно зарисовать мазки с завершенным и незавершенным фагоцитозом.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Естественный врожденный иммунитет, гуморальные и клеточные факторы.

2. Естественные киллеры.

3. Антигенпредставляющие клетки, их функции.

4. Толл-подобные рецепторы.

5. Система мононуклеарных фагоцитов, функции.

6. Фагоцитоз, стадии, механизмы, виды.

7. Система комплемента, характеристика, пути активации.

8. РСК, ингредиенты, механизм, назначение.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 20-33, 134-135.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 111-113.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Микроскопия и зарисовка мазков с завершенным и незавершенным фагоцитозом.

Учет демонстрационной РСК с целью серодиагностики (оформление протокола).

Ингредиенты Разведения исследуемой сыворотки Контроль

1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 ГС АГ К

Исследуемая сыворотка 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

Антиген в рабочей дозе 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

Комплемент в рабочей дозе 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

Физ. раствор 0,3 0,1 0,2

Инкубация При 37⁰С 1 час или при 4^оС 18-20 часов

Гемолитическая система рабочая доза 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Инкубация При 37⁰С 1 час

Результат:

Заключение:

Примечание: начинают учет с контрольных пробирок 8, 9, 10, отмечая в графе результат наличие или отсутствие гемолиза, при учете опытных пробирок в результате отмечают РСК+ или РСК -.

ЗАНЯТИЕ №12

Тема: Динамика иммунного ответа. Серологические реакции: агглютинации, РПГА, реакция Кумбса, нейтрализации.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Уметь ставить ориентировочную и развернутую реакцию агглютинации с целью определения вида микроба и оценивать результат.

3. Уметь ставить и оценивать результат РПГА с целью определения титра антител в сыворотке больного.

4. Знать назначение и способы получения препаратов: диагностикум, агглютинирующая сыворотка, антитоксическая сыворотка, эритроцитарный диагностикум, анатоксин.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Динамика иммунного ответа, неспецифические механизмы защиты.

2. Специфический иммунный ответ на Т-независимые АГ.

3. Специфический иммунный ответ на Т-зависимые АГ, презентация, процессинг, индукция, эффекторная фаза.

4. Иммунный ответ против внутриклеточных микроорганизмов, опухолевых клеток.

5. Механизмы ограничения иммунного ответа.

6. Первичный и вторичный иммунный ответ.

7. Реакция агглютинации: ингредиенты, ее виды, назначение.

8. РПГА, ингредиенты, назначение.

9. Реакция Кумбса, ингредиенты, назначение.

10. Реакция нейтрализации: виды, ингредиенты, назначение.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 47-66, 127-132, 135-136.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 106-110, 113.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Постановка реакции агглютинации для определения вида микроба.

а) Ориентировочная реакция агглютинации на стекле.

Ингредиенты: 1. Неизвестная культура микроорганизма.

2. Агглютинирующая неадсорбированная сыворотка Е.coli 1:5.

3. Физиологический раствор.

Зарисовать полученный результат и сделать заключение.

б). Учет демонстрационной развернутой реакции агглютинации для определения вида микроба.

Ингредиенты Разведения диагностической сыворотки

1:1000 1:2000 1:4000 1:8000 1:16000 К

Физ. раствор 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0

Агглютинирующая сыворотка 1:500 Е.coli 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 -

Исследуемая культура по 3 капли во все пробирки

Термостат 37⁰С 18-20 часов

Результат:

Заключение:

Примечание: агглютинирующая сыворотка разводится до титра, указанного на этикетке. Титр сыворотки Е.coli – 1:8000.

2. Учет демонстрационной РПГА для определения титра антител в сыворотке больного (серологический метод диагностики).

Ингредиенты Разведения сыворотки больного

1:20 1:40 1:80 1:160 К

Физ. раствор 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4

Сыворотка больного 1:10 0,4 0,4 0,4 0,4 -

Диагностикум эритроцитарный 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4

Результат

Заключение:

ЗАНЯТИЕ №13

Тема: Оценка иммунного статуса. Серологические реакции: ИФА, РИА, РИФ, иммуноблотинг. Основы иммунопрофилактики и иммунотерапии.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Уметь по демонстрационным препаратам проводить учет реакции бласттрансформации.

3. Уметь учитывать результаты иммуноферментного анализа для выявления иммуноглобулина Е.

4. Уметь оценивать по готовым препаратам результаты НСТ-теста.

5. Знать препараты для иммунопрофилактики и иммунотерапии.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Иммунный статус, методы иммунодиагностики.

2. Характеристика Т-лимфоцитов, методы оценки.

3. Характеристика В-лимфоцитов, методы оценки.

4. Характеристика системы гранулоцитов и моноцитов. Методы оценки. НСТ-тест. Характеристика системы комплемента.

5. РИФ, виды, ингредиенты.

6. ИФА, ингредиенты, цель постановки, учет реакции.

7. РИА, цель применения, ингредиенты.

8. Иммуноблотинг.

9. Вакцины, виды, цель применения.

10. Иммунные антисыворотки и иммуноглобулины.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 119-125, 136-141, 143-157.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 115-123.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Учет РБТЛ на аллергены по готовым препаратам. Подсчет и определение содержания бластных форм лимфоцитов (в %) из 100 лимфоцитов.

2. Учет НСТ-теста по готовым препаратам. Определение процентного содержания клеток с зернами диформазана (из 100 нейтрофилов).

3. Учет ИФА для определения иммуноглобулина Е.

4. Разбор биопрепаратов.

Общий принцип ИФА для обнаружения антител

ЗАНЯТИЕ №14

ТЕМА: Иммунодефициты. Аллергия, аутоиммунные реакции. Аллергены. Кожно-аллергические пробы. Противоопухолевый иммунитет, иммунитет в системе мать-плод.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Иметь представление об аллергических реакциях и способах выявления сенсибилизации организма.

3. Уметь оценить результаты РПГА на ревматоидный фактор.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Иммунопатология. Классификация. Основные виды.

2. Иммунодефициты, виды, причины.

3. Аллергия, определение. Общая характеристика. Типы аллергических реакций по Геллу-Кумбсу.

4. Реакции повышенной чувствительности немедленного типа, виды. Анафилактический тип аллергических реакций.

5. Цитотоксические, иммунокомплексные, антирецепторные реакции. Аллергические и аутоиммунные заболевания, развивающиеся по этому механизму.

6. Реакции повышенной чувствительности замедленного типа. Аллергические, аутоиммунные и инфекционные заболевания, развивающиеся по этому механизму.

7. Кожно-аллергические пробы, использование их в диагностике. Аллергены для кожно-аллергических проб, получение, применение.

8. Особенности противоопухолевого иммунитета. Особенности иммунитета в системе «мать-плод».

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007, стр. 79-106, 112-115, 117-118, 142.

3.«Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 121.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

Постановка и учет РПГА на ревматоидный фактор

Ингредиенты Разведения сыворотки больного

1:10 1:20 1:40 1:80 К

Физ. раствор 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Сыворотка больного 1:5 0,2 0,2 0,2 0,2 -

Диагностикум эритроцитарный 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2

Термостат 37⁰С 1 час

Результат:

Заключение:

ЗАНЯТИЕ №15

Тема: Итоговое занятие по иммунологии.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал занятий №.10-15.

2. Знать препараты для диагностики, иммунопрофилактики и иммунотерапии.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Определение понятия «иммунитет», феномены иммунитета, «иммунологическая память». Система иммунитета: подсистемы, центральные и периферические органы. Центральные понятия системы иммунитета: антигены, антитела, рецепторы, цитокины.

2. Виды иммунитета.

3. Цитокины: общие свойства, классификация. Интерлейкины.

4. CD-антигены.

5. Т-лимфоциты, развитие и дифференцировка. Субпопуляции Т-лимфоцитов.

6. В-лимфоциты, развитие и дифференцировка. Функция В-лимфоцитов.

7. Антигены: определение, свойства, виды.

8. Инфекционные антигены, виды, характеристика.

9. Неинфекционные антигены, виды.

10. Система HLA-антигенов, роль в иммунологии.

11. Иммуноглобулины: определение, структура.

12. Классы иммуноглобулинов, характеристика.

13. Антитела: виды, механизмы действия. Моноклональные антитела, получение, применение.

14. Естественный врожденный иммунитет: гуморальные и клеточные факторы.

15. Антигенпредставляющие клетки, их функции. Толл-рецепторы.

16. Система мононуклеарных фагоцитов, функции.

17. Фагоцитоз: стадии, механизмы, виды.

18. Естественные киллеры, механизмы активации, функция.

19. Система комплемента: характеристика, пути активации.

20. Динамика иммунного ответа: неспецифические механизмы защиты.

21. Специфический иммунный ответ на Т-независимые АГ.

22. Специфический иммунный ответ на Т-зависимые АГ: презентация, процессинг, индукция, эффекторная фаза.

23. Иммунный ответ против внутриклеточных микроорганизмов, опухолевых клеток.

24. Механизмы ограничения иммунного ответа.

25. Первичный и вторичный иммунный ответ.

26. Иммунный статус, методы иммунодиагностики.

27. Характеристика Т- и В-лимфоцитов, методы оценки.

28. Характеристика системы гранулоцитов и моноцитов. Методы оценки. НСТ-тест. Характеристика системы комплемента.

29. Серологические реакции: общая характеристика, назначение.

30. Реакция преципитации, ингредиенты реакции, цель постановки. Виды реакции преципитации.

31. Реакция агглютинации: ингредиенты, ее виды, назначение.

32. РПГА: ингредиенты, назначение. Реакция Кумбса: ингредиенты, назначение.

33. Реакция нейтрализации: виды, ингредиенты, назначение.

34. РСК: ингредиенты, механизм, назначение.

35. РИФ: виды, ингредиенты.

36. ИФА: ингредиенты, цель постановки, учет реакции.

37. РИА: цель применения, ингредиенты.

38. Иммуноблотинг.

39. Вакцины, виды, цель применения.

40. Иммунные антисыворотки и иммуноглобулины.

41. Иммунопатология. Классификация. Основные виды.

42. Иммунодефициты, виды, причины.

43. Аллергия: определение. Общая характеристика. Типы аллергических реакций по Геллу-Кумбсу.

44. Реакции повышенной чувствительности немедленного типа, виды. Анафилактический тип аллергических реакций.

45. Цитотоксические, иммунокомплексные, антирецепторные реакции. Аллергические и аутоиммунные заболевания, развивающиеся по этому механизму.

46. Реакции повышенной чувствительности замедленного типа. Аллергические, аутоиммунные и инфекционные заболевания, развивающиеся по этому механизму.

47. Особенности противоопухолевого иммунитета. Особенности иммунитета в системе «мать-плод».

48. Кожно-аллергические пробы, использование их в диагностике. Аллергены для кожно-аллергических проб, получение, применение.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. «Основы иммунологии» Д.К.Новиков, И.И. Генералов, Н.В. Железняк, 2007.

Биопрепараты: гемолитическая сыворотка, комплемент, агглютинирующая брюшнотифозная сыворотка, противодифтерийная сыворотка, сыворотка преципитирующая белок человека, диагностикум брюшнотифозный, эритроцитанрый диагностикум, брюшнотифозная люминесцирующая сыворотка, антиглобулиновая люминесцирующая сыворотка, столбнячный анатоксин, АКДС, БЦЖ, иммуноглобулин против сибирской язвы.

ЗАНЯТИЕ №16

ТЕМА: Химиотерапия. Антибиотики. Методы определения чувствительности микробов к антибиотикам.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Знать теоретический материал по теме занятия.

2. Овладеть методикой определения чувствительности микробов к антибиотикам методом бумажных дисков.

3. Научиться оценивать чувствительность микробов к антибиотикам методом серийных разведений в бульоне и агаре по демонстрационному материалу.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1.Антимикробные средства. Химиотерапия. Характер действия химиотерапевтических препаратов. Химиотерапевтический индекс.

2. Антибиотики. Определение, требования к антибиотикам.

3. Классификация антибиотиков: по происхождению, по химической структуре, по спектру действия.

4. Классификация антибиотиков по механизму действия.

5. Классификация побочных реакций антимикробных препаратов.

6. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам.

7. Механизмы развития лекарственной устойчивости. Пути преодоления резистентности микроорганизмов к лекарственным препаратам.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2002, стр. 102-1119.

1. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 124-132.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Определение чувствительности стафилококка к антибиотикам методом бумажных дисков.

День исследо-вания Материал исследования Ход исследования Результат

Культура S.aureus 5*10⁸КОЕ/мл. Посев 1 мл культуры на чашку Петри с МПА сплошным газоном. На поверхность МПА пинцетом поместить диски с антибиотиками.

Измерение диаметра зоны задержки роста культуры стафилококка вокруг дисков. Антибиотики: 1. _______- ___мм. 2. _______- ___мм. 3. _______- ___мм. 4. _______- ___мм. 5. _______- ___мм.

Заключение:

Примечание: в заключении отметить степень чувствительности S.aureus к антибиотикам, исходя из следующих критериев:

· зона задержки до 10 мм – культура устойчива к антибиотику

· зона задержки 11-15 мм – культура мало чувствительна к антибиотику

· зона задержки 16-25 мм – культура чувствительна к антибиотику

· зона задержки больше 25 мм – культура высоко чувствительна к антибиотику.

2. Определение чувствительности E.coli к левомицетину методом серийных разведений.

Окончательная концентрация антибиотика, ед/мл

Ингредиенты К

Мясо-пептонный бульон 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0

Антибиотик в концентрации 256 мкг/мл 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 -

Исследуемая 18 ч культура E.coli 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1

Термостат 37^оС 24 ч

Результат:

Заключение о МИК антибиотика:

3. Демонстрация Е-теста.

ЗАНЯТИЕ №17

ТЕМА: Инфекция. Роль микро- и макроорганизма в развитии инфекционного процесса. Формы взаимодействия микро- и макроорганизма. Виды инфекций. Биологический метод исследования.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Освоить теоретический материал по теме занятия.

2. Знать сущность биологического метода исследования.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Определение понятия «инфекция» («инфекционный процесс») и «инфекционная болезнь».

2. Классификация патогенных микробов (патогенные, условно-патогенные, сапрофиты).

3. Патогенность, вирулентность, определение, единицы измерения.

4. Методы усиления и ослабления вирулентности.

5. Факторы патогенности: адгезины, факторы агрессии и инвазии.

6. Экспериментальная инфекция. Цель и методы заражения лабораторных животных.

7. Экзотоксин, анатоксин, получение, свойства.

8. Эндотоксин, получение, свойства.

9. Источники инфекции. Механизмы и пути передачи возбудителей.

10. Пути и способы проникновения патогенных микробов в организм. Входные ворота инфекции.

11. Формы инфекционных болезней и инфекционного процесса: по длительности течения, по происхождению, по проявлению. Реинфекция, суперинфекция, рецидив, смешанные инфекции, вторичная инфекция. Бактерионосительство.

13. Виды инфекционных болезней по локализации патологического процесса (очаговые, генерализованные). Бактериемия, вирусемия, септицемия или сепсис, септикопиемия, токсинемия.

14. Особенности инфекционных болезней. Периоды развития инфекционного заболевания.

15. Спорадические инфекционные болезни, эпидемия, пандемия, эндемия.

16. Внутрибольничные (госпитальные) инфекции, причины их возникновения.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2002, стр. 120-135.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр. 100-104.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1. Учесть результаты биологического метода исследования:

1) микроскопия мазков-отпечатков из органов трупа белой мыши после внутрибрюшинного заражения культурой K. pneumoniae, окраска мазков фуксином, микроскопия,

2) учет посевов из органов погибшей мыши на чашке Петри с МПА.

2. Сделать заключение о характере распространения экспериментальной инфекции в организме белой мыши.

ЗАНЯТИЕ №18

Тема: Генетика микроорганизмов.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Освоить теоретический материал по теме занятия.

2. Научиться выявлять "S" и "R" формы колоний.

3. Научиться учитывать опыты трансформации и трансдукции.

4. Научиться оценивать опыт по выявлению действия карболовой кислоты на характер роста протея.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Генетический аппарат микроорганизмов.

2. Генотип, фенотип бактерий, виды изменчивости.

3. Фенотипическая изменчивость (примеры).

4. Генетическая изменчивость, ее виды. Мутации, диссоциации.

5. Is-последовательности. Транспозоны.

6. Трансформация.

7. Трансдукция.

8. Конъюгация.

9. Плазмиды, их роль.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская микробиология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2002, стр. 72-76, 88-92.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр.59-62.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

Учет демонстрационного опыта трансформации.

День исследования Материал исследования Ход исследования Результат исследования

1. ДНК ауксоавтотрофа, способного синтезировать триптофан 2. Реципиент – ауксогетеротроф B. subtilis, не способный синтезировать триптофан 3. Среда без триптофана Приготовить смыв с реципиентной культуры. По 0,5 мл смыва внести в 2 стерильные пробирки. В пробирку №1 добавить 0,5 мл физраствора (контроль), в пробирку №2 – 0,5 мл. ДНК. Инкубация в термостат при 37^оC 1 ч. Пересев из обеих пробирок на голодную среду без триптофана

Учет опыта трансформации

Заключение:

2. Учет демонстрационного опыта трансдукции.

День исследования Материал исследования Ход исследования Результат исследования

1. Бактериофаг, трансдуцирующий способность разлагать лактозу 2. E.coli, штамм, не разлагающий лактозу. 3. Среда Эндо Приготовить смыв E.coli. По 0,5 мл смыва внести в 2 стерильные пробирки. В пробирку №1 добавить 0,5 мл физ.раствора (контроль). В пробирку №2 добавить 0,5 мл бактериофага. Инкубация в термостате при 37^оС 1 ч. Пересев из обеих пробирок на среду Эндо

Учет опыта трансдукции

Заключение:

Учет демонстрационного опыта модификационной изменчивости Proteus vulgaris.

День исследования Материал исследования Ход исследования Результат исследования

1. Культура Proteus vulgaris 2.Чашка с МПА 3.Чашка с карболовым агаром Посев на чашку с простым и карболовым агаром одним штрихом. Инкубация в термостате при 37^оС 24 ч.

Учет роста на МПА. Учет роста на карболовом агаре

Заключение:

4. .Демонстрация R- и S-форм колоний.

ЗАНЯТИЕ №19

Тема: Бактериофагия.

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ЗАНЯТИЯ:

1. Освоить теоретический материал по теме занятия.

2. Научиться определять титр бактериофага на жидкой и плотной питательной среде.

3. Ознакомиться с опытом фаготипирования бактерий.

ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:

1. Бактериофаги, строение, классификация.

2. Механизм взаимодействия фага с бактериальной клеткой.

3. Вирулентные и умеренные фаги.

4. Получение, титрование и применение фагов.

5. Генная инженерия.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Лекционный материал.

2. Учебник «Медицинская вирусология» под редакцией проф. Д.К. Новикова, проф. И.И. Генералова, 2002, стр. 23-28.

3. «Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии» Н.П. Елинов, стр.56-58.

САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА:

1.Демонстрация опыта фаготипирования бактерий.

2. Демонстрация титрования бактериофага на плотной питательной среде.

3. Учет опыта титрования бактериофага на жидкой питательной среде.

Протокол титрования бактериофага на жидкой питательной среде

Ингредиенты Разведения бактериофага

10^-1 10^-2 10^-3 10^-4 10^-5 10^-6 10^-7 К

Мясо-пептонный бульон 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5 4,5

Бактериофаг кишечной палочки 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

Кишечная палочка По одной петле бульонной культуры во все пробирки

Термостат 37^оС 18-20 часов

Результат:

Заключение:

Учебное издание

Железняк Наталья Васильевна

Фролова Аэлита Валерьевна

Зубарева Ирина Валерьевна

Беренштейн Татьяна Феликсовна и др.

<== предыдущая страница	\|	следующая страница ==>
Chlamidia trachomatis	\|	Квалификация (степень) выпускника: бакалавр

Дата добавления: 2014-09-08; просмотров: 799; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!

lektsiopedia.org - Лекциопедия - 2013 год. | Страница сгенерирована за: 0.041 сек.