Бензидиновая проба

Сущность реакции заключается в том, что в присутствии фермента пероксидазы перекись водорода окисляет бензидин. В результате окисления бензидина образуется парахинондиимид, который с неокисленным бензидином дает соединение, окрашенное в голубовато-зеленый цвет, переходящий в бурый.

Активность пероксидазы зависит от рН среды и содержания окисляющих веществ в вытяжке, вследствие чего полного соответствия между бензидиновой реакцией и концентра-циией водородных ионов не наблюдается. При рН концен-трированных вытяжек (1:4) ниже 6,0 результат реакции с бензидином в большинстве случаев положительный, при рН 6,1—6,2 — сомнительный, а при рН выше 6,2 — отрицательный. В вытяжках слабо концентрированных (1 10) положительная бензидиновая реакция обнаруживается обычно при показателе рН до 6,3, сомнительная— 6,3—6,4, отрицательная — 6,5 и выше. В водных вытяжках, приготовленных в соотношениях 1: 4 и 1: 10, из одной пробы мяса результаты реакции одинаковые.

Ход реакции. В пробирку наливают 2 мл фильтрата, 5 капель 0,2%-ного спиртового раствора бензидина и 2 капли 1%-ного раствора перекиси водорода.

Вытяжка из свежего мяса здоровых животных приобретает зелено-синий цвет, переходящий через несколько минут в бурый В вытяжках из мяса больных, переутомленных и убитых в агонии животных цвет не изменяется, но иногда зелено-синий цвет появляется с большой задержкой и быстро переходит в бурый.

Реакцию на пероксидазу можно ставить без приготовления вытяжки на свежий разрез мяса наносят 2 кап­ли 1%-ного раствора перекиси водорода и 5 капель 0,2%- ного раствора бензидина, появление сине-зеленого пятна с последующим переходом в бурое расценивают как положительную реакцию, отсутствие цветного пятна считают за отрицательную реакцию.

Дата добавления: 2015-06-30; просмотров: 370; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!