Цветная окислительная реакция

В вытяжках из мяса, в котором имеются токсигенные или большое количество гнилостных микроорганизмов, содержится много легко окисляющихся веществ. В вытяжках из мяса, необсемененного микробами, таких веществ значительно меньше.

Мясные вытяжки после добавления к ним окислительно-восстановительного индикатора окрашиваются в присущий ему цвет (синий, зеленый). Если к мясной вытяжке прилить затем в определенном объеме раствор марганцовокислого калия, то при незначительном содержании окисляющихся веществ индикатор быстро обесцветится (восстановится) и вытяжка приобретет цвет марганцовокислого калия. При содержании в вытяжках большого количества легко окисляющихся веществ, они свяжут такой же объем КМп04, вследствие чего цвет индикатора сохранится. Объясняется это тем, что легко окисляющиеся вещества тормозят восстановление окислительно-восстановительного индикатора.

Приготовление вытяжки предусматривает извлечение из мяса токсических веществ микроорганизмов и освобождение её от белков. Помимо индикатора и марганцовокислого калия, к вытяжкам добавляют раствор азотнокислого серебра и соляной кислоты. Азотнокислое серебро переводит токсины в окисленную (лабильную) форму, соляная кислота создает резко кислую среду, необходимую для быстрого течения окислительной реакции. Цветная окислительная реакция будет положительной при наличии в мясе сальмонелл, кишечной палочки протея или других грамотрицательных токсигенных микроорганизмов, а также при содержании в нем большого количества гнилостных микробов. С вытяжками из мяса свиней, больных рожей, цветная окислительная реакция отрицательна. Такой же результат получается и при выделении из мяса нетоксигенных (сапрофитных) микроорганизмов. Показания цветной окислительной реакции с пробами обсемененного мяса зависят от способности микробов к токсинообразованию.

Данную реакцию можно ставить с мясом млекопитающих, птиц и рыб, а также с солониной. На ее показания влияют некоторые факторы. Так, реакцию нельзя ставить с вытяжками из мяса, полученного в первые часы после убоя животного. Не показательна она и для оттаянного мяса. В вытяжках из такого мяса, вследствие пониженного содержания в нем воды, будет больше окисляющихся веществ, чем в остывшем мясе.

Ход реакции. В пробирку наливают 2 мл вытяжки из исследуемой пробы и добавляют в нее реактивы в такой последовательности: одну каплю 1 %-ного спиртового раствора крезилблау (1% метиленовая синь), три капли 0,5%-ного раствора азотнокислого серебра и одну каплю 40%-ной соляной кислоты (вытяжку готовят так же, как и для формольной реакции, см. стр. 18). После этого пробирку сильно встряхивают, добавляют из микропипетки 0,15 мл 1 %-ного раствора марганцовокислого калия и снова встряхивают. В другую пробирку для контроля берут 2 мл физиологического раствора или 2 мл вытяжки из мяса заведомо здорового животного и добавляют реактивы в тех же количествах и в той же последовательности. Реакцию читают дважды на белом фоне: сразу же после ее постановки и через 10—15 минут; второй результат считается окончательным.

При наличии микробов или их токсинов в исследуемой пробе цвет вытяжки остается синим или зеленым, при отсутствии микробных токсинов вытяжка окрашивается в розово-красный или красно-бурый цвет.

Если в мясе содержится незначительное количество микробных токсинов, то вытяжка становится фиолетовой, а иногда даже и обесцвечивается, но через 10—15 минут цвет ее снова восстанавливается.

Дата добавления: 2015-06-30; просмотров: 272; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!