ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

Естественно переболевшая или вакцинированная птица приобретает иммунитет, про­должительность и напряженность которого зависит от возраста птицы, биологических свойств вируса и метода введения его в организм.

Для специфической профилактики применяют инактивированные и живые вакцины. Количество первых последнее время значительно сокращалось. Однако односторонняя ори­ентация на живые вакцины разной степени аттенуации и в ряде случаев нежелательные по­следствия их применения вынудили исследователей и практических специалистов вновь вернуться к инактивированным препаратам, правда, более современным.

Применение живых вакцин.Ассортимент живых вакцин, применяемых в настоящее время весьма широк: Н, В, F, FR, Комаров, Roakin, Ла Сота, Банковский, Муктесвар, Мин-несот, Бургас, Нью-Джерси, Нью-Йорк, Накарелла, К, ГАМ, V4 и др. Среди вакцин­ных лентогенных штаммов вируса НБ известны - В, NDP, LZ58 и Clone 30, Ulster 2C.

В 1989 г. в Австралии выделен шт. N4, характеризующийся полной авирулентностью для птицы и активным распространением его среди птиц (высокой контагиозностью). Вирус вызывает иммунитет при введении интраокулярно, внутримышечно и аэрозольно. Он перси-стирует в организме привитой птицы до 2 лет. У подсаженной не привитой птицы к вакци­нированной в течение 80 дн обнаруживались AT. Несмотря на низкие титры (ниже 3 Iog2 ) привитая птица обладала устойчивостью к заражению вирулентным вирусом, что свидетельствует о развитии местного секреторного или клеточно-опосредованного иммунитета без высоких титров гуморальных AT .

Пероральная вакцинация шт.У4 (Австрия) стимулирует лимфоидные ткани кишечного тракта, что индуцирует секреторные иммуноглобулины и обеспечивает защиту даже при низком уровне циркуляторных гуморальных AT. Шт. V4, заданный с питьевой водой или кормом, после вакцинации выделяется в окружающую среду. По мнению авторов, перо-ральная вакцинация этим штаммом может разрешить ряд проблем профилактики НБ в не­больших фермерских хозяйствах. Пылевидная вакцина из шт La-Sota разработана во ВНИИВВиМ. В основе технологии изготовления использован метод сушки смеси вируссодержащего материала с наполните­лем. Вакцина обеспечивает высокий иммунологический эффект и практически не обладает реактогенностью в широком диапазоне доз, имеет выраженную иммуногенность для цыплят 14-16 нед возраста в благополучном и стационарно неблагополучном стаде птиц.

В ВГНКИ ветпрепаратов проведены исследования по совершенствованию методов кон­троля иммуногенности вакцин против НБ. Установленный минимальный защитный титр ан-ти-ГА 3 Iog2 и более давал вполне объективную информацию о иммуногенности вакцины Для исключения погрешностей в методику была включена референс-вакцина НБ, позво­ляющая правильно интерпретировать получаемые результаты и более дифференцировано подходить к оценке этого показателя у серийно производимого препарата. Референс-серии готовят во ВГНКИ, контролируют на соответствие заложенным в ТУ параметрам и постав­ляют на биопредприятия Новая методика предусматривает 10-кратный запас иммуногенно­сти и обязательное соответствие параметрам референс-серий не менее чем на 80% Экспе­риментально определены иммунизирующие дозы (НМД), обеспечивающие абсолютную за­щиту птицы от 1000 ЛД₅₀ вирулентного вируса (ИМД₉₀), равные для шт La Sota / 6,7 lg ЭИД₅₀, для шт. Бор/74 ВГНКИ - 6 lg ЭИД₅₀ при интраназальном применении и 7,7 и 7,0 lg ЭИД₅₀ соответственно при энтеральном применении. Они оказались значительно выше, чем в случаях применения серий вакцин с минимально допустимой по ТУ активностью (8,0 lg ЭИД₅о /см³). В связи с этим минимально допустимая инфекционная активность препара­тов увеличена до 9 lg ЭИД₅₀ /см³.

В СНГ широко применяют сухие вирусвакцины из шт. Н, Bl, La Sota, Бор/74/ВГНКИ. В профилактике НБ важна разработка оптимальной схемы иммунизации птицы Наиболее подходящий возраст для первой вакцинации - 10-14-й день, а для ревакцинации - 5-6 нед. Лучшие результаты получены при аэрозольной вакцинации в 10-дн, 5- и 8-нед возрасте. У индюшат осложнения после применения живой вакцины против НБ в 2-3 нед возрасте свя­зывают с подавлением вакцинным вирусом фагоцитарной активности альвеолярных макро­фагов. Во избежание этого предложена более рациональная схема иммунизации индюшат В первый день жизни им вводят подкожно инактивированную вакцину в дозе 0,1 мл, а через 2 нед аэрозольно вакцинируют живой вакциной из шт В1 Такая вакцинация обеспечивает длительный иммунитет. Высокий уровень поствакцинального иммунитета у матерей не пре­пятствовал иммунизации суточных индюшат инактивированной вакциной. В неблаго­получных товарных хозяйствах рекомендуют прививать индеек аэрозольно с интервалом 5 нед в течение всего производственного периода. Преимущество гранулированных форм вакцин из шт.У4 u Roakin в их более высокой термостабильности; их можно транспортировать без рефрижератора и смешивать с любым обычным кормом.

Активность клеточного иммунитета у цыплят, вакцинированных шт. V4 вируса НБ, оп­ределяли с помощью теста ингибиции миграции лейкоцитов (ИМЛ).

Исследовали роль защитных реакций слизистых оболочек в создании поствакцинально­го иммунитета. Цыплят вакцинировали 2-кратно с 2-неделышм интервалом интраназально, интраокулярно и введением вакцины в зоб. Каждый цыпленок получал дозу 7,8 lg ЭИД₅₀ /шт V4. Через неделю в сыворотке и слезной жидкости цыплят, вакцинированных всеми способами, обнаруживали повышение уровня AT. Оральная вакцинация inr.V4 индуцирует у цыплят не только гуморальные иммунные реакции, но и реакции иммунокомпетентных элементов слизистых оболочек. Показана высокая интерферирующая активность ПМВ-2, что необходимо учитывать при изготовлении эмбриональной вакцины против НБ .

Получена живая вакцина из мутанта шт. Hitchner В1 путем клонирования методом бля­шек серийными пассажами при температуре 28-30°С. Н.А. Лагуткин и соавт. реко­мендуют выпускать вакцины из шт. Bl, La Sota и Бор/74 ВГНКИ с активностью не ниже 9 lg ЭИД₅₀/мл и с титром в РГА не ниже 1:128. Доза при интраназальном (окулярном) введе­нии должна быть 2-4 млн. ЭИД₅₀/мл, а при пероральном применении 10-20 млн. ЭИД₅₀/мл с выпаиванием 2 дня подряд. Э.Ф. Токарик и соавт. рекомендовали свой способ профилактики НБ, суть которого со­стоит в том, что цыплят в суточном возрасте иммунизируют вакциной из шт. La-Sota в дозе 20-40 ЭИД₅о/на голову. После вакцинации цыплятам с кормом вводили пробиотик Авилакт-1К в суточной дозе 0,5 - 1,5% от массы корма 2-мя циклами по 7-15 дн с перерывом 15-12 дн. Использование пробиотика Авилакт-lK повышал антигенность вируса La Sota, усиливал иммунный ответ и устраняет нежелательное действие материнских AT при иммунизации су­точных цыплят. Экспериментальное обоснование эффективной дозы вакцины и перевод её дозировки с объёмных единиц в количественные (ЭИД₅₀) проведено во ВНИТИБП. Для цыплят 15-20-сут возраста эффективная защитная доза (защита 80-100%) при интраназальной вакцинации составляет 10³-10⁶ ЭИД₅₀ при титрах анти-ГА 1:8-1:512. Для цыплят 5-сут возраста, имевших материнские AT, эффективная доза составляет 10^б,3 ЭИД₅₀. В опытах с использованием для заражения цыплят как 100 ЛД₅₀, так и 2-10⁶ ЛД₅₀ вирулентного штамма вируса НБ показано, что применение вакцины в дозах 1-10⁶-5-10⁶ ЭИД₅о обеспечивало защиту как 5, так и 20-сут цыплят. Динамика накопления анти-ГА и устойчивости птицы следующая: на 4-й день титр анти-ГА составлял 1:8-1:16, степень за­щиты - 70%; на 6-й день - титр - 1:32, защита - 90%; на 8-й день титр - 1:32-1:64, защита 100%; на 14-й день титр - 1:64-1:512, защита - 100%. Максимальное накопление анти-ГА наблюдалось через 30 дн, к 120-му дню титр их снижался до 1:8-1:4. Однако степень защи­ты через 3 мес составляла 92-100%, через 5 мес - 70-85%.

Пассивный иммунитет у цыплят имеет прямое отношение к вирусоносительству и виру-совыделению. Так, при заражении пассивно иммунных цыплят патогенным вирусом 68% из них не проявляли признаков болезни в течение 80 дн наблюдения, но выделяли вирус в те­чение 45 дн, а вирусоносительство наблюдалось 54 дня. Этот факт имеет большое эпизоотологическое значение при проведении мероприятий по санации хозяйств от НБ.

Во ВНИИВВиМ разработана новая технология ассоциированной вирус-вакцины против ИЛТ и НБ. Она позволяет получать вакцины для аэрогенного применения с активностью 7 lg ЭИД₅₀ /см³ по вирусу ИЛТ и 7,2-7,7 lg ЭИД₅₀ /см³ по НБ; для интраназального и орально­го применения - по ИЛТ не ниже 7,0 lg ЭИД₅₀ /см³, по НБ не ниже 9,0 lg ЭИД₅₀ /см³. После двукратной вакцинации в оптимальных дозах иммунитет формируется у 85-100% птиц и со­храняется около 6 мес.

На основе мезогенного шт. ГАМ-61[А(в)ВН], выделенного из эпизоотического и затем аттенуированного в культуре клеток почек теленка и КЭ, разработана новая вакцина. После испытания в лабораторных и камеральных условиях установлено, что штамм обладает вы­сокой иммуногенностью: обеспечивает защиту 97-100% птицы, привитой различными спо­собами; безвреден в 10- и 100-кратной дозе для цыплят моложе 60-дн возраста, кроме того, его можно использовать в хозяйствах с острой эпизоотической ситуацией Иммунитет на­ступает через 72-96 ч. Высокая эффективность вакцины подтверждена на 8-миллионном по­головье птиц в стационарно неблагополучных хозяйствах Ставропольского и Краснодарско­го краев. Авто­рами изучен механизм формирования ранней невосприимчивости экспериментально инфи­цированных цыплят, привитых вакциной из шт ГАМ-61. Результаты опытов показали, что в механизме формирования ранней невосприимчиво­сти к вирусу НБ ведущая роль принадлежит факторам клеточного иммунитета. Защитное влияние гуморальных AT проявляется значительно позже, и в течение первых 3-5 сут не в полной мере отражает истинный иммунологический статус организма .

Аэрозольная вакцинация эффективна и безопасна только в стадах, благополучных по респираторным заболеваниям вирусной или бактериальной природы. В противном случае она провоцирует проявление ИЛТ, микоплазмоза и других болезней

Применение инактивированных вакцин.Инактивированные вакцины обычно при­меняют в сочетании с живыми. Хороший защитный эффект получали, если однодневных цыплят прививали живой вакциной, а через 3 и 8 нед - инактивированной.

Предложено одновременное применение живых и убитых вирусов НБ для вакцинации суточных цыплят с низким уровнем материнских AT. В качестве живой вакцины использо­вали лентогенный шт. La Sota, а в качестве инактивированной - формолвакцину, содержа­щую неионизированный детергент твин-80 в виде водно-масляной эмульсии с низким со­держанием минерального масла. Живую вакцину вводили в глазнично-носовую область, а инактивированную- подкожно Титры специфических AT у цыплят, привитых живой вакци­ной медленно возрастали в период с 28-го по 73-й день, в то время как уровень AT у цыплят второй группы, привитых одновременно живой и инактивированной вакцинами, был по­стоянен. Разовая одновременная вакцинация в инкубационном зале обеспечивает стойкий иммунитет на весь период откорма бройлеров и позволяет исключить ревакцинацию. Инактивированные вакцины готовят из вируса, размноженного в КЭ. Активность одной дозы вакцины обычно не менее 8 lg ЭИД₅₀/см³ инактивированного вируса Концентрация его оказывает существенное влияние на титр сывороточных AT В качестве инактивантов вируса НБ используют формальдегид, р-пропиолактон, этиленимин Хорошими адъювантными свойствами обладал авридин. Вакцина с авридином не вызывала реакций на месте введения. Помимо того, инактивированную эмульгированную вакцину типа "вода в масле" готовили с помощью р-пропиолактона и в качестве эмульгатора использовали арлацел и твин-80. Кур прививали в возрасте 8 нед, когда полностью исчезали материнские AT. Вакцину вводят 2-3 раза с 4-нед интервалом. Подкожное введение оказалось более эффек­тивным, чем внутримышечное. Максимальные титры сывороточных анти-ГА составляли 1:1280-1:2560. AT сохранялись в течение 30 или 35 нед соответственно после 2- и 3-кратной вакцинации. Напряженный иммунитет сохранялся свыше года. При хранении вакцины с адъювантом при 4°С более 18 мес ее эффективность не снижалась. При однократной вакци­нации кур в возрасте 16 нед титр AT начинал снижаться через 12 нед.

Вакцина против НБ оказалась эффективной против парамиксовируса птиц типа 3, вызы­вающего снижение продуктивности у индеек. Хороший иммунитет создавала вакцина из го­мологичного вируса, вводимая двукратно. Вакцина из парамиксовируса-3 защищала птицу от вируса НБ, но не наоборот, т.е. имеет место одностороннее АГ родство.

Оценка поствакцинального иммунитета.Эффективность вакцинации зависит от им-муногенности вакцинного штамма, наличия пассивного иммунитета, возраста цыплят, дозы и метода введения вакцины, соблюдения сроков между прививками, техники вакцинации, очередности применения более или менее аттенуированных штаммов, физиологического со­стояния организма птицы и пр. Поэтому схемы и методы вакцинации должны разрабаты­ваться для конкретных хозяйств исходя из эпизоотической ситуации. При проведении про­филактической вакцинации необходимо добиваться создания 100%-ного напряженного им­мунитета у птицы всех возрастных групп. Этого можно достигнуть в том случае, если в хо­зяйстве хорошо организована система контроля поствакцинального иммунитета. Эффективность вакцинации против НБ можно оценивать двумя способами: биопробой и определением титра анти-ГА. Во втором способе исследуют сыворотки в РГГА. Для этого через 12-15 дн после вакцинации берут кровь от 25 цыплят из 5-6 точек каждого птичника. Напряженность иммунитета проверяют также за несколько дней перед следующей вакцина­цией. В угрожаемых и бывших неблагополучных хозяйствах напряженность иммунитета у взрослой птицы проверяют через каждые 60 дн. Вакцинацию считают эффективной, если в более 80% проб исследуемой сыворотки крови цыплят в возрасте до 30 дн AT выявляли в разведениях 1:8 и выше, у молодняка до!20дн-1:16и выше, у взрослых кур - 1:64 и выше, меньшие титры AT служат показателем необходимости ревакцинации птицы. Анти-ГА появляются на 7-10-й день после вакцинации; титр их достигает максимально­го уровня 1:256-1:2048 к 25-30-му дню. Через 60 дн после вакцинации титры AT снижаются (1:8-1:256), а через 5-6 мес остаются только их следы. Через 2 мес после вакцинации у 99,5-100% исследованных желтков яиц титры AT выше 1:8. Выявлена четкая корреляция титров в сыворотке крови и пульпе пера в отношении материнских AT, так и в отношении активно выработанных AT на 60-96-й дн после вакцинации. Если после ревакцинации уровень сероконверсии равен 1,2 и более, то иммунизация проведена качественно и своевременно, если он ниже 1,2 или отрицательный, то прививка птицы была сделана без учета титра пассивных или высокого титра активных AT. Случаи низкой сероконверсии или слабой напряженности иммунитета после первичной вакцинации отмечают при недостаточном АГ-раздражении (заниженной прививной дозе), иммунизации птицы с высоким титром AT, сближении срока ревакцинации и частых АГ раздражении (многократные вакцинации за короткий промежуток времени), нарушении гигиены кормле­ния и содержания, острых инфекционных болезнях или влиянии других иммунодепрессивных факторов. Высокий уровень AT и сохранение его в течение года и более после однократной имму­низации вирусвакцинами из штаммов Bl, La Sota, F, Br или инактивированной ГОА-вакциной свидетельствует о циркуляции среди птиц полевого вируса НБ. Необходимо обратить внимание на недостаточное АГ раздражение при оральном при­менении вакцины. Однократное выпаивание препарата в рекомендуемых дозах индуцирует выработку специфических AT только у 20-70% птиц, а применение его 2 дня подряд, как правило, обеспечивает устойчивость к вирулентному вирусу у 80-100%.

Генно-инженерные вакцины.Сконструирован рекомбинант вируса оспы птиц, экс-прессирующий ГА-нейраминидазный протеин вируса НБ. Рекомбинант обладал выражен­ными защитными свойствами - птица, иммунизированная внутримышечно, после одной прививки через 28 сут выдерживала заражение вирулентным вирусом. Для получения рекомбинантной живой вакцины ген слияния А вируса НБ клонировали под контролем про­мотора Р75 в вакцинный штамм ВЧП по Coity Spel. Был отобран один рекомбинант fp EFF2, у которого ген F был выявлен в концевых повторах геномной ДНК. Считается что данная векторная система может быть использована для получения генно-инженерной мультива-лентной вакцины, экспрессирующей гены таких патогенных для птиц вирусов как ИБ, БМ, ИЛТ, ИББ.

Дата добавления: 2014-03-03; просмотров: 667; Нарушение авторских прав

Мы поможем в написании ваших работ!