Главная страница Случайная лекция
Мы поможем в написании ваших работ!
Порталы:
БиологияВойнаГеографияИнформатикаИскусствоИсторияКультураЛингвистикаМатематикаМедицинаОхрана трудаПолитикаПравоПсихологияРелигияТехникаФизикаФилософияЭкономика
Мы поможем в написании ваших работ!
Инструкция ИФА по сыворотке крови
(Блокинг) блокирует АТ характерные для лейкоза.
Растворяем 20% концентрат промывочного раствора 100мл - 1900мл. дистиллированной воде.
| Количество раствора | Дистиллир.вода | 20% концентрат промывоч. р-ра |
| 190 | ||
| 300 | ||
| 400 | ||
По 50 мкл. промывочного раствора заливаем в каждую лунку микротитр. пластину.
3.50 мкл. положительного контроля в лунку А-1;
4.50 мкл. отрицательного контроля в лунку В-1;
5.50 мкл. отрицательного контроля в лунку С-1;
6.По 50 мкл. испытуемых образцов сыворотки в Д-1; и т.д.
Плотно закрыть пластину.
7.Инкубируем 30 мин. (±3мин) при t+22С ( ± 4° С ) и выливаем.
8..Заливаем по 300 мкл. в каждую лунку и промываем 3 раза.
9.Развести конъюгат: 1: 100(10 мл. промывочного раствора — отнять 0,1 мл + 0,1 мл конъюгата).
10.Конъюгат залить по 100 мкл вкаждую лунку.
11.Инкубировать 60 мин.( + 5 мин.) при t +22 С ( ± 4° С) и выливаем.
12.Промываем З раза по 300 мкл.
13.После последней промывки, положить пластину на впитывающее поло-
тенце, чтобы полностью освободить лунки от промывочного раствора!
14.Залить по 100 мкл. «ТМВ» ( раствор выявления-2) в каждую лунку . ,
Инкубировать 20 мин. при t +22° С ( ± 4 0 С ), закрыть от света ( хранить в темном месте).
15.Залить по 100 мкл. «Стоп - раствора» (раствор остановки) в каждую лунку.
16.Слегка взболтать пластину, пока цвет раствора не станет однородным. Тщательно вытереть нижнюю сторону пластины.
17.Учет реакции в течение 1 часа, после « Стоп - раствора», при условии, что пластина хранится в темноте.
Показание: С/П = ОП образца\ ср. ОП негатив.контр × 100
18.Реакция считается достоверной и правильной при:
- отрицательный контроль имеет минимальное значение величины ОD 450-0,800
- Положительный контроль / Средний отрицательный контроль равен или ниже 20%.
ИНТЕРПРИТАЦИЯ
- Пробы равны или ниже 40% - положительные.
- Пробы равны или больше 40% - отрицательные.
СЛЕДУЙЩИЙ ДЕНЬ
СЕГОДНЯ ПРОДОЛЖИЛИ ПЛАНОВЫЕ ИИСЛЕДОВАНИЯ НА МАРКЕРЫ ЛЕЙКОЗА проба поступила из хозяйства официально признаным свободным от энзоотического лейкоза.
Инструкция ИФА по молоку (Скрининг)
| <== предыдущая страница | | | следующая страница ==> |
| МЕРОПРИЯТИЯ В СТАДАХ НЕБЛАГОПОЛУЧНЫХ ПО ЭНЗООТИЧЕСКОМУ ЛЕЙКОЗУ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА | | | Порядок отбора проб молока для постановки ИФА |
Дата добавления: 2014-06-19; просмотров: 409; Нарушение авторских прав
Мы поможем в написании ваших работ!