МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА ОБЩИЙ АНАЛИЗ КРОВИ

для проведения занятия со студентами

III курса лечебного, медико-диагностического факультетов и ФПСЗС

по пропедевтике внутренних болезней

Тема № 5 (лечебный факультет, 3 часа); № 6 (медико-диагностический факультет, 2 часа): Общий клинический анализ крови, мокроты и

плевральной жидкости.

1. Учебные и воспитательные цели, мотивация для усвоения темы, требования к исходному уровню знаний

1.1. Цель занятия

Научиться технике взятия крови для общего клинического анализа, собирания мокроты, взятия плевральной жидкости. Обучиться методике определения основных компонентов общего анализа крови, ознакомиться с лабораторными исследованиями мокроты и плевральной жидкости, клинической трактовке результатов общего анализа крови, анализов мокроты и плевральной жидкости.

1.2. Мотивация для усвоения темы

Полное обследование пациента предполагает использование основных (расспрос, осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация) и дополнительных (лабораторных и инструментальных) методов исследования. При постановке диагноза приоритет следует отдавать результатам расспроса и физикальных исследований, однако при ряде заболеваний решающую роль могут играть данные вспомогательных, в частности, лабораторных исследований. Поэтому правильный выбор необходимого объема лабораторных диагностических тестов и углубленное их клиническое толкование во многом предопределяют успех и своевременность постановки диагноза, выбор терапии, контроль за ее эффективностью.

1.3. Требования к исходному уровню знаний

Студент должен знать

1. Технику взятия крови для общего клинического анализа.

2. Методику определения основных компонентов общего анализа крови: количества гемоглобина, скорости оседания эритроцитов, количества эритроцитов, индексов красной крови – среднего содержания гемоглобина в одном эритроците и цветового показателя, гематокрита, диаметра и осмотической резистентности эритроцитов, количества тромбоцитов и ретикулоцитов, количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы.

3. Методику сбора мокроты.

4. Технику проведения плевральной пункции.

5. Методику проведения проб Ривальта и Лукерини.

6. Отличительные признаки экссудата и транссудата.

Студент должен уметь

1. Давать клиническую трактовку результатов общего анализа крови.

2. Проводить макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое и бактериологическое исследования мокроты.

3. Проводить макроскопическое, физико-химическое и бактериологическое исследование плевральной жидкости.

4. Давать клиническую оценку результатов лабораторного анализа мокроты и плевральной жидкости.

2. Контрольные вопросы из смежных дисциплин

1. Гистологические особенности клеток крови.

2. Нормальная физиология системы кроветворения.

3. Анатомия и гистология верхних и нижних дыхательных путей.

4. Анатомические и гистологические особенности строения плевры.

5. Функции плевры.

3. Контрольные вопросы по теме занятия

1. Техника взятия крови для общего клинического анализа.

2. Методика определения концентрации гемоглобина, количества эритроцитов и ретикулоцитов. Расчет индексов красной крови: цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. Диагностическое значение. Гематокритное число.

3. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов и диаметра эритроцитов. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Диагностическое значение.

4. Методика определения количества лейкоцитов.

5. Методика определения количество тромбоцитов. Диагностическая трактовка.

6. Методика сбора мокроты.

7. Исследование мокроты макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое. Понятие о бактериологическом методе исследования мокроты.

8. Техника проведения плевральной пункции.

9. Лабораторное исследование плевральной жидкости: макроскопический, микроскопический, физико-химический и бактериологический анализ. Методика проведения проб Ривальта и Лукерини. Отличительные признаки экссудата и транссудата.

11. Бронхоскопия. Методика проведения. Понятие о биопсии бронхов и легких.

4. Практическая часть занятия

1. Клиническая трактовка результатов общего анализа крови (см. ход занятия, п.2-5).

2. Проведение макроскопического, микроскопического, бактериоскопического и бактериологического исследования мокроты (см. ход занятия, п.7).

3. Проведение макроскопического, физико-химического и бактериологического исследования плевральной жидкости (см. ход занятия, п.9).

4. Клиническая оценка результатов лабораторного анализа мокроты и плевральной жидкости (см. ход занятия, п.7,9).

5. Ход занятия

В ходе занятия обсуждаются контрольные вопросы согласно темы занятия и отрабатываются практические навыки (п.4.).

1. Техника взятия крови для общего клинического анализа.

Взятие крови для общего клинического анализа крови производят путем укола в мякоть IV пальца левой руки или мочку уха. Для укола палец обрабатывают ватным шариком, смоченным раствором антисептика, чаще всего септоцида. Укол лучше производить сбоку, где более густая капиллярная сеть, на глубину 2-3 мм в зависимости от толщины кожи. Кровь из ранки должна вытекать свободно, так как при сильном надавливании на палец возможно примешивание тканевой жидкости, приводящее к искажению результатов.

Не рекомендуется брать кровь сразу после физической и умственной нагрузки, приема медикаментов, физиотерапевтических процедур, диагностических манипуляций. Необходимо производить забор крови натощак. Повторные исследования желательно проводить в одни и те же часы, поскольку морфологический состав крови подвержен колебаниям на протяжении суток.

Для исследования гемограммы используют пробирочный метод взятия крови. Точная дозировка крови и разводящих жидкостей достигается с помощью калиброванных пипеток и дозаторов.

Общий клинический анализ крови включает определение следующих компонентов:

1) количество гемоглобина;

2) количество эритроцитов;

3) индексы красной крови (цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците);

4) скорость оседания эритроцитов (СОЭ);

5) гематокритное число;

6) осмотическая резистентность эритроцитов и их диаметр;

7) количество ретикулоцитов;

8) количество лейкоцитов и лейкоцитарная формула;

9) количество тромбоцитов.

2. Методика определения концентрации гемоглобина, количества эритроцитов и ретикулоцитов. Расчет индексов красной крови: цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците. Диагностическое значение. Гематокритное число.

Предложено много методов определения концентрации гемоглобина. Важнейшие из этих методов – колориметрические. Чаще колориметрируют цветные производные гемоглобина: хлорид гематина, цианметгемоглобин, карбоксигемоглобин и др. Концентрацию гемоглобина измеряют фотоэлектроколориметрами, приборами ГФ-2 и ГФ-3, гемоглобинометрами при автоанализаторах.

Унифицированным является цианметгемоглобиновый фотометрический метод. Он основан на превращении гемоглобина в цианметгемоглобин при добавлении к крови реактива (раствора Драбкина), содержащего железосинеродистый калий и цианид калия. Концентрацию цианметгемоглобина измеряют фотометрически, а расчет количества гемоглобина производят по калибровочному графику.

Гематиновый метод Сали основан на превращении гемоглобина при добавлении к крови хлористоводородной кислоты в хлорид гематина (хлоргемин) коричневого цвета, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина. В настоящее время этот метод не имеет широкого применения.

В норме концентрации гемоглобина составляет:

- у женщин 120 - 150 г/л;

- у мужчин 130— 160 г/л .

Увеличение концентрации гемоглобина наблюдается у людей, живущих в условиях высокогорья, при обезвоживании у работников горячих цехов, после обильной рвоты и при диарее, при массивных ожогах, при эритремии и др.

Уменьшение концентрации гемоглобина наблюдается при анемиях, а так же при обильном употреблении жидкости, гемодилюции лекарственными инфузионными средствами и др.

Определение количества эритроцитов крови выполняется следующими методами:

1. Подсчет эритроцитов в счетной камере с сеткой Горяева.

Принцип метода: в строго определенном объеме каме­ры подсчитывают под микроскопом клеточные элементы, а затем производят перерасчет полученного результата на 1 мкл крови. С целью уменьшения количества клеток, подлежащих подсчету, кровь предварительно разводят в смесителях или пробирках.

Оборудование и реактивы:

1) смесители (меланжеры) или пробирки для разведе­ния крови;

2) 3 % раствор хлорида натрия или жидкость Гайема для разведения эритроцитов (ртути хлорид - 0,5 г; натрия сульфат - 5,0 г; натрия хлорид - 1,0 г; вода дистиллиро­ванная - до 200 мл);

3) счетная камера Горяева;

4) микроскоп.

Смесители представляют собой капиллярную пипетку с резервуаром, содержащим бусинку, способствующую смешиванию крови с жидкостью для разведения. На сме­сителе нанесены метки: одна - 0,5, другая - перед входом в резервуар - 1,0, третья - у выхода из ампулы - 101. При набирании крови в пипетку до метки 0,5 она будет разве­дена в 200 раз, до 1,0 - в 100 раз.

Счетная камера представляет собой стеклянную плас­тинку с выгравированной или наклеенной сеткой Горяе­ва. Обычно на одной пластинке имеются две сетки, разде­ленные между собой глубокой канавкой, что позволяет ис­пользовать одну сетку для подсчета эритроцитов, а другую - для подсчета лейкоцитов. По краям сеток находятся воз­вышения, к ним притираются покровные стекла, которые образуют верхнюю границу камеры. Притирать покров­ные стекла нужно очень плотно до появления радужных колец (так называемых колец Ньютона), ибо только в этом случае будут соблюдены необходимые высота (1/10 мм) и объем счетной камеры. Сетка Горяева имеет 225 больших квадратов (15 х15), 25 из которых раз­делены на малые, по 16 в каждом. Каждая сторона малого квадрата равна 1/20 мм, а так как высота камеры состав­ляет 0,1 мм, то объем счетной камеры, ограниченной од­ним малым квадратом, будет равен 1/4000 мм³.

Ход исследования: в сухую чистую пробирку или сме­ситель отмеривают раствор хлорида натрия или жидкость Гайема. Пипеткой от гемометра Сали набирают кровь из пальца, вытирают кончик пипетки марлей или фильтро­вальной бумагой, выдувают кровь на дно пробирки с жидкостью для разведения. Подготавливают камеру Горяева. Затем концом круглой стеклянной палочки или пастеровской пипеткой наносят каплю разведенной кро­ви на среднюю пластинку камеры у края покровного стекла.

Интерпретация полученных данных. Подсчет эрит­роцитов производят спустя 1-2 мин после заполнения ка­меры (когда эритроциты осядут на дно камеры) при малом увеличении микроскопа (объектив 8х, окуляр - 10х или 15х) и при затемненном поле зрения (при опущенном кон­денсоре или прикрытой диафрагме). Считать эритроциты необходимо в 5 больших квадратах, т. е. в 80 маленьких, расположенных по диагонали. Подсчету подлежат все эритроциты, лежащие внутри малого квадрата, и те, кото­рые находятся на левой и верхней линиях. Эритроциты, расположенные на правой и нижней линиях, не считают, так как они будут учтены в следующем квадрате.

Количество эритроцитов в 1 мкл (мм³) крови высчиты­вают по следующей формуле:

Х=(А х 4000 х В)/Б,

где X - количество форменных элементов в 1 мкл крови; А - количество форменных элементов, сосчитанных в опреде­ленном количестве малых квадратов (для эритроцитов - в 80); Б - количество сосчитанных малых квадратов (80); В - степень разведения крови (для подсчета эритроцитов -100 или 200); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем количество клеток в 1 мкл (1 мм³), так как объ­ем 1 маленького квадрата равен 1/4000 мм.

Для перевода в систему СИ (пересчет на 1 л крови) по­лученную цифру умножают на 10⁶ (или количество целых единиц умножают на 10¹²).

Методика подсчета эритроцитов в счетной камере дос­таточно точна (ошибка может достигать 2,5 %), но весьма трудоемка. Ошибки могут быть обусловлены: образовани­ем сгустка, недостаточным количеством подсчитанных квадратов, несоблюдением условий, обеспечивающих правильную высоту счетной камеры (притирание покров­ных стекол без образования радужных колец), неравно­мерным заполнением камеры (образование пузырьков воздуха), подсчетом эритроцитов без выжидания 1-2 мин (эритроциты не успевают осесть и результат оказывается заниженным), плохо вымытыми смесителем и счетной ка­мерой, недостаточной квалификацией лаборанта, выпол­няющего исследование.

2. Фотометрический метод подсчета количества эритроцитов – основан на фотометрическом измерении степени погашения света определенных длин волн взвесью эритроцитов. Процент задержанного света прямо пропорционален числу эритроцитов. Для этого используют приборы типа эритрогемометров и электрофотоколориметры.

3. Электронно-автоматический метод. Используются приборы автоматического счета частиц крови, работающие по импульсному и сцинтиляционному принципу (счетчики «Целлоскоп» и «Культер», автоанализаторы «Техникон»).

Нормальное количество эритроцитов:

- у женщин 3.7 – 4.7 х 10¹²/л;

- у мужчин 3,9 - 5,1 х 10¹²/л.

Увеличение количества эритроцитов наблюдается:

1) при эритремии (абсолютный первичный эритроцитоз);

2) при гипоксии: обструктивная вентиляционная недостаточность, при наличии альвеолярно-капиллярного блока – фиброзирующий альвеолит и легочные васкулиты, врожденные пороки сердца с шунтом справа налево и др;

3) при гемоглобинопатиях (наследственные заболевания, характеризующиеся наличием в эритроцитах аномальных гемоглобинов);

4) при вторичных абсолютных эритроцитозах, связанных с повышенной продукцией эритропоэтинов (рак почек, гидронефроз и поликистоз почек, рак печени и др.);

5) при вторичных абсолютных эритроцитозах, связанных с избытком адренокортикостероидов или андрогенов (феохромоцитома, синдром / болезнь Иценко-Кушинга, гиперальдостеронизм);

6) при относительных эритроцитозах вследствие обезвоживания, стрессов, алкоголизма, повышенной физической нагрузки, проживания в условиях высокогорья и др.

Уменьшение количества эритроцитов характерно для анемий различного происхождения. От истинной анемии, характеризующейся абсолютным уменьшением эритроцитарной массы, нужно отличать анемию (эритроцитопению) вследствие гидремии (снижение гематокрита из-за увеличения объема плазмы).

Уменьшение количества эритроцитов (анемия, эритроцитопения) наблюдается при постгеморрагических анемиях, анемиях вследствие недостаточного кровеобразования (железодефицитная, витамин-В12- и фолиеводефицитная), анемиях в результате усиленного распада эритроцитов (гемолитические), железоперераспределительных и метапластических (при опухолевых заболеваниях крови) анемиях и др.

Расчет индексов красной крови: цветовой показатель и среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.

Под индексами красной крови понимают среднее содержание гемоглобина в одном эритроците и цветовой показатель.

Определение среднего содержания гемоглобина в одном эритроците производят делением концентрации гемоглобина на число эритроцитов в одинаковом объеме крови. В норме 1 эритроцит содержит 33 пг гемоглобина (допустимые колебания 27-33.4 пг).

Величину 33 пг условно принимают за единицу (норма содержания гемоглобина в одном эритроците) и обозначают как цветовой показатель.

Цветовой показатель отражает насыщение эритроцита гемоглобином.

Вычисление цветового показателя (ЦП) производят по формуле:

ГЕМОГЛОБИН (в г/л) х 3

ЦП = -------------------------------------------------------------------;

три первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)

ГЕМОГЛОБИН (в г/%)

ЦП = -------------------------------------------------------------------;

две первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)

ГЕМОГЛОБИН (в условных единицах)

ЦП = -------------------------------------------------------------------

две первые цифры числа эритроцитов (в миллионах)

В норме цветовой показатель равен 0,85 – 1,05.

Индексы красной крови важны для суждения о нормо-, гипер-, гипохромии эритроцитов.

Гиперхромия – увеличение среднего содержания гемоглобина в 1 эритроците, дающее цветовой показатель выше 1.05, зависит исключительно от увеличения объема эритроцитов, а не от повышенного насыщения их гемоглобином, так как нормальный эритроцит насыщен гемоглобином до предела. Гиперхромия характерна для мегалобластных анемий, обусловленных дефицитом витамина В₁₂ и фолиевой кислоты.

Гипохромия – уменьшение среднего содержания гемоглобина в 1 эритроците, дающее ЦП ниже 0.85, может быть так же следствием уменьшения объема эритроцитов. Гипохромия служит истинным показателем или дефицита железа в организме, или железорефрактерности. Гипохромия наблюдается при хронических кровопотерях, железодефицитных и железорефрактерных анемиях, свинцовой интоксикации и др.

Нормохромия – это нормальное содержание гемоглобина в эритроците (ЦП -0,85-1,05). Нормохромные анемии развиваются при равномерном уменьшении содержания эритроцитов и количества гемоглобина и наблюдается в случаях острых кровопотерь, при гипопластической анемии, при гемолизе, сепсисе.

Гематокрит (гематокритное число) – дает представление о соотношении между объемом плазмы и объемом форменных элементов крови. Определяется с помощью следующих методов.

1. Метод центрифугирования в гематокритной трубке.

2. Электронно-автоматический метод (с помощью аппаратов «Целлоскоп» и «Культер»).

Нормальные величины гематокрита:

- у женщин 36-42%;

- у мужчин 40-48%.

Гематокритное число учитывается при диагностике полицитемических и олигоцитемических состояний.

Ретикулоциты – это молодые эритроциты, содержащие базофильную субстанцию в виде сеточки, представленную агрегированными рибосомами и митохондриями. Сеточка обнаруживается при прижизненной окраске мазков крови 1% раствором бриллианткрезил синего. Подсчет производится под иммерсионным объективом по отношению к 1000 эритроцитов.

В норме содержание ретикулоцитов в периферической крови составляет 2-10º/○○ (0,2-1,2%). Ретикулоцитоз отображает степень регенераторной способности костного мозга. При гемолизе, кровопотерях эритропоэз в нормальном костном мозге активизируется, и число ретикулоцитов в нем и в периферической крови возрастает. Отсутствие роста числа ретикулоцитов в выше указанных ситуациях свидетельствуют о пониженной функции костного мозга.

Ретикулоцитоз при отсутствии анемии говорит о скрытых, но хорошо компенсированных потерях крови. Высокий ретикулоцитоз наблюдается при адекватном лечении витамин-В₁₂-дефицитной анемии.

3. Методика определения осмотической резистентности эритроцитов и диаметра эритроцитов. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Диагностическое значение.

Резистентность – свойство эритроцитов противостоять разрушительным воздействиям: тепловым, осмотическим, механическим и др. В клинике наибольшее значение приобрело определение осмотической резистентности.

Принцип метода состоит в том, что эритроциты в гипертонических солевых растворах сморщиваются, а в гипотонических – набухают. При значительном набухании наступает гемолиз.

В пробирках готовят растворы хлорида натрия различной концентрации (от 0.70 до 0.22%), затем вносят в них один и тот же объем крови (0.02 мл) и оставляют на час при комнатной температуре. Через час пробирки центрифугируют и определяют начало гемолиза по легкому порозовению раствора и полный гемолиз – по интенсивной красно-лаковой окраске раствора.

В норме минимальная резистентность у взрослых людей колеблется между 0,48% и 0,46% хлорида натрия, максимальная – между 0,34% и 0,32% хлорида натрия.

Снижение осмотической резистентности эритроцитов наблюдается при наследственном микросфероцитозе (болезнь Минковского-Шоффара), аутоиммунных гемолитических анемиях. Повышение осмотической резистентности эритроцитов встречается при наследственных гемолитических анемиях, связанных с дефицитом глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, при некоторых гемоглобинопатиях (талассемия).

Измерение диаметра эритроцитов и графическую регистрацию распределения эритроцитов по величине (эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса) производят с помощью прямых микроскопических и электронно-автоматических методов.

Прямой микроскопический метод – это измерение диаметра эритроцитов в фиксированном и окрашенном мазке крови с использованием окуляр – микрометра и объектив-микрометра. Измеряют диаметр 200-500 различных эритроцитов, результаты распределяют по группам в зависимости от величины диаметра и устанавливают в процентах (%) относительную численность каждой группы.

Нормы: содержание нормоцитов (диаметр 6.9-8.0 мкм) составляет приблизительно 68%, микроцитов (диаметр менее 6.9 мкм) – 15%, макроцитов (диаметр более 8.0 мкм) – 17%.

Прямой микроскопический метод чрезвычайно трудоемок, отнимает много времени и поэтому уступает электронно-автоматическому методу.

Электронно-автоматический метод – это подсчет эритроцитов различного диаметра с помощью счетчиков «Культер» и «Целлоскоп».

Эритроцитометрическая кривая Прайс-Джонса в норме имеет правильную форму с вершиной на 7.2 мкм и довольно узким основанием в пределах 6-9 мкм.

Увеличение диаметра эритроцитов (макроцитоз) со сдвигом кривой Прайс – Джонса вправо наблюдается при мегалоцитарных анемиях (витамин-В₁₂-фолиеводефицитные), при заболеваниях печени, при алкоголизме.

Уменьшение диаметра эритроцитов (микроцитоз) со сдвигом эритроцитометрической кривой влево встречается при наследственном микросфероцитозе, железодефицитной анемии, интоксикации свинцом.

Нормальные эритроциты имеют форму диска с вдавлением в центре. В патологических случаях могут появлять­ся эритроциты с измененной формой. Изменение формы эритроцитов называется пойкилоцитозом. Встречаются следующие формы эритроцитов.

Сфероциты - эритроциты, имеющие округлый или ша­рообразный вид, утратившие двояковогнутую форму. Микросфероциты имеют иногда обычные размеры. Сфероцитоз бывает наследственным и приобретенным. Наблю­дается при наследственном микросфероцитозе (болезнь Минковского-Шоффара), гемолитических анемиях, сеп­сисе, искусственных клапанах сердца.

Овалоциты (эллиптоциты) - эритроциты овальной фор­мы. Встречаются при талассемии, наследственном овалоцитозе, тяжелых железодефицитных анемиях, анемиях при лейкозах.

Мишеневидные эритроциты (таргентные клетки, лептоциты) - плоские, бледные, с центральным скоплением гемоглобина в виде мишеней. Бывают при талассемии, тя­желых железодефицитных анемиях, после спленэктомии, при различных видах желтух, алкоголизме. Стоматоциты — центральное просветление у таких эритроцитов изогнуто, напоминает форму рта. Встречают­ся при наследственных стоматоцитозах (относятся к гемо­литическим анемиям), после переливания крови, при опу­холях и циррозе печени, остром алкогольном отравлении.

Акантоциты - эритроциты зазубренной формы, имею­щие выпячивания различной величины. Обнаруживают­ся при наследственных акантоцитозах, тяжелых заболе­ваниях печени (токсических гепатитах, циррозах), гипо­тиреозе, терапии гепарином, хроническом алкоголизме, после спленэктомии.

Эхиноциты - эритроциты с несколькими выростами, как бы покрытые шипами, колючками. Такие формы наб­людаются при тромбоцитопенической пурпуре, раке же­лудка, уремии. Если в мазке все эритроциты имеют такую форму, это говорит о неправильной фиксации мазка.

Каплевидные эритроциты имеют форму капель. Встре­чаются при миелофиброзе и токсических гепатитах.

Анулоциты - эритроциты в виде пустых колец. Наблю­даются в периферической крови при тяжелых формах железодефицитных анемий.

Серповидные эритроциты (дрепаноциты) имеют форму серпов, полулуний, овсяных зерен. Образуются в крови при серповидно-клеточной анемии.

В отличии от анизоцитоза, пойкилоцитоз является бо­лее поздним признаком анемии и отмечается при более тя­желом течении.

В норме зрелые эритроциты периферической крови не содержат никаких включений. И только в ретикулоцитах при суправитальной окраске красителем бриллиант-крезил-блау выявляется зернистосетчатая субстанция.

При различных патологических состояниях в перифе­рической крови обнаруживаются эритроциты с различны­ми включениями: базофильная пунктация — мелкая, си­него цвета, равномерно расположенная в цитоплазме зер­нистость, встречается при отравлении свинцом, ртутью и нередко при некоторых анемиях (мегалобластные, талассемия и др.); крапчатость Шуффнера - мелкая красного цвета зернистость, отмечается при трехдневной малярии; пятнистость Маурера - небольшие сиреневого или красно­го цвета пятнышки, встречаются при тропической маля­рии; тельца Гейнтца-Эрлиха - круглые резко очерченные включения по периферии эритроцита, появляются при отравлении гемолитическими ядами типа нитробензола, анилина, фенилгидразина, при лучевой болезни; тельца Жолли - круглые, сине-фиолетового цвета образования; кольца Кебота - нежные петельки красного цвета. Они имеют вид колечка, восьмерки или скрипичного ключа. Тельца Жолли представляют собой остатки ядерной суб­станции нормобластов, а кольца Кебота - остатки ядерной оболочки и встречаются главным образом при витамин-В₁₂- и фолиеводефицитной анемии, тяжелых отравлениях гемолити­ческими ядами.

Помимо телец Жолли и колец Кебота при витамин-В_12- и фолиеводефицитной анемии в периферической крови можно увидеть клеточные элементы мегалобластического типа кроветворения, который в норме отмечается только в эмб­риональном периоде.

При мегалобластическом кроветворении в кроветвор­ной ткани вместо эритробластов образуются мегалоблас­ты, которые способны к ранней гемоглобинизации при сохранившейся еще структуре ядра. По сродству к щелоч­ным или кислым красителям они подразделяются на базофильные, оксифильные и полихроматофильные. Большая их часть распадается в костном мозге, а меньшая - созре­вает до мегалоцитов, которые и поступают в перифериче­скую кровь. При резком обострении заболевания в пери­ферическую кровь попадают не только мегалоциты, но и мегалобласты. Мегалобласт представляет собой крупную клетку (диаметром более 15 мкм) с эксцентрично располо­женным круглым или овальным ядром. Мегалоциты - это безъядерные клетки размером от 12 до 15 мкм, значитель­но насыщенные гемоглобином. Поэтому цветной показа­тель, как правило, при В₁₂- и фолиево-дефицитной ане­мии больше 1,0 (эту разновидность анемии относят к гиперхромным).

Оседание эритроцитов – это свойство клеток крови осаждаться (седементировать) за пределами кровеносного русла (на дне сосуда при сохранении крови в несвертывающемся состоянии), оставляя сверху слой плазмы. Этот феномен лежит в основе определения скорости оседания эритроцитов (СОЭ), которая выражается в миллиметрах плазмы, отстаивающейся в течение часа.

Наиболее распространен микрометод определения СОЭ в модификации Панченкова.

Принцип метода: при стоянии крови, стабилизиро­ванной цитратом натрия, эритроциты оседают с различ­ной скоростью в зависимости от физико-химических свойств крови. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) вы­ражается в мм/ч.

Оборудование и реактивы:

1) аппарат Панченкова, состоящий из штатива с капил­лярами шириной 1 мм, на стенке которых нанесены деле­ния от 0 (сверху) до 100 (снизу). На уровне 0 мм имеется бук­ва К (кровь), а на середине капилляра, около метки 50 мм - буква Р (реактив);

2) агглютационные (видалевские пробирки);

3) 5% свежеприготовленный раствор натрия цитрата;

4) вата;

5) раствор антисептика;

6)копья-скарификаторы.

Ход исследования. В капилляр Панченкова набирают 5% раствор натрия цитрата до метки «Р» - 50 мм и выду­вают его в видалевскую пробирку. Затем этим же капил­ляром, держа его горизонтально, из уколотого пальца на­бирают два раза кровь до метки «К» - 0 мм и выпускают ее в пробирку с натрия цитратом. Хорошо перемешивают. Этим же капилляром набирают цитратную кровь до мет­ки «К» и ставят строго вертикально в штатив. Получен­ное соотношение объемов крови и натрия цитрата равно 1:4. Через 1 ч отмечают по делениям на капилляре число миллиметров освободившегося от эритроцитов столбика плазмы.

Интерпретация полученных данных. Нормальные показатели СОЭ:

- у мужчин - СОЭ 1-10 мм/ч;

- у женщин - СОЭ 2-15 мм/ч

Дети имеют более низкую СОЭ (1-8 мм/ч), чем взрослые, а лица среднего возраста меньше, чем старики.

Изменение СОЭ при патологии.

1. Значительное увеличение – опухолевые заболевания, диффузные болезни соединительной ткани, тяжелые инфекции, болезни почек, протекающие с нефротическим синдромом, выраженная витамин-В₁₂-фолиеводефицитная анемия.

2. Умеренное увеличение – острые и хронические инфекционные заболевания, локализированные гнойные процессы, инфаркт миокарда, гипертиреоз, тяжелый сахарный диабет, внутренние кровотечения, интоксикации ртутью и мышьяком.

3. Снижение – эритремия, вторичные симптоматические эритроцитозы, ацидоз, тяжелая сердечная недостаточность.

4. Методика определения количества лейкоцитов.

Подсчет количества лейкоцитов крови может быть произведен в счетной камере Бюркера с сеткой Горяева или в электронно-автоматических анализаторах («Целлоскоп», «Культер», «Техникан»).

Методика подсчета в камере Бюркера с сеткой Горяева

Принцип метода: аналогичен таковому подсчету эритроцитов, суть его состоит в точном отмеривании кро­ви и ее разведении в определенном объеме жидкости с по­следующим подсчетом клеточных элементов в счетной ка­мере и пересчете полученного результата на 1 крови.

Оборудование и реактивы:

1) смесители или пробирки для подсчета лейкоцитов;

2) 3% раствор уксусной кислоты, к которому прибавлено несколько капель метилвиолета или метиленового синего;

3)счетная камера;

4) микроскоп.

Смеситель для лейкоцитов отличается от такового для эритроцитов тем, что имеет более широкий просвет капил­ляра и меньший по величине резервуар. На смеситель нане­сены три метки: 0,5, 1,0 и 11. Это позволяет развести кровь в 10 либо в 20 раз (чаще разводят в 20 раз).

Ход исследования: при взятии крови для подсчета лей­коцитов с кожи предварительно удаляют ватным тампо­ном остатки крови и, слегка сдавливая палец, выпускают свежую каплю крови. При работе со смесителями кровь набирают до метки 0,5, затем разводят 3 % раствором ук­сусной кислоты до метки 11. Энергично встряхивают в те­чение 3 мин, после чего сливают 1-2 капли и заполняют счетную камеру. При работе с пробирками для подсчета лейкоцитов наливают 0,4 мл 3% раствора уксусной кисло ты и в нее выпускают 0,02 мл крови, отмеренной пипет­кой от гемометра Сали. Тщательно встряхивают пробир­ки, затем в жидкость опускают пипетку и, набрав содер­жимое, заполняют счетную камеру. Так как лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов, то для получения до­стоверного и точного результата подсчет производят в 100 больших (неразграфленных) квадратах. Обычно в одном большом квадрате находится 1-2 лейкоцита. Число лей­коцитов в 1 мкл крови рассчитывается аналогично расче­ту числа эритроцитов по формуле

X = (А х 4000 х В)/Б,

где X - количество лейкоцитов в 1 мкл крови; А - количе­ство лейкоцитов, сосчитанных в 1600 малых квадратах; Б - количество сосчитанных малых квадратов (1600); 4000 - величина, умножая на которую, мы получаем ко­личество клеток в 1 мкл.

Интерпретация полученных данных. Нормальное количество лейкоцитов: 4.0 – 9.0 х 10⁹/л. Уменьшение их числа в кро­ви называется лейкопенией, увеличение - лейкоцитозом.

Лейкоцитоз может быть абсолютным (истинным) и от­носительным (перераспределительным).

Абсолютный лейкоцитоз – наблюдается при острых воспалительных процессах, некрозе тканей, острых бактериальных инфекциях (за исключением брюшного тифа, бруцеллеза, туляремии и др.), аллергических состояниях, злокачественных опухолях (с деструкцией тканей), закрытых травмах черепа и кровоизлияниях в мозг, диабетической и уремической коме, шоке, острой кровопотере, как первичная реакция – при лучевой болезни. Значительное повышение количество лейкоцитов встречается при лейкозах.

От­носительный (перераспределительный) является следствием поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для нее депо. Это происходит после приема пищи (пищевой лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз), интенсивной мышечной работы (миогенный лейкоцитоз) и т.д.

Лейкопения. Лейкопения рассматривается как показатель угнете­ния функциональной способности костного мозга в ре­зультате воздействия токсических веществ (мышьяк, бен­зол и т.п.), некоторых медикаментов (сульфаниламиды, левомицетин, бутадион, иммуран, циклофосфан и т.п.), вирусов (гриппа, вирусного гепатита, кори и т.п.), микро­бов (брюшного тифа, бруцеллеза и т.п.), ионизирующей радиации, рентгеновского излучения и гиперспленизма (увеличение функции селезенки).

Лейкоцитоз и лейкопения редко характеризуются пропорциональным увеличением (снижением) суммарного числа лейкоцитов всех видов (например лейкоцитоз при сгущении крови); в большинстве случаев имеется увеличение (уменьшение) числа какого-либо одного типа клеток, поэтому применяют термины «нейтрофилез», «нейтропения», «лимфоцитоз», «лимфопения», «эозинофилия», «эозинопения», «моноцитоз», «моноцитопения», «базофилия».

При клинической оценке изменения количества лейкоцитов большое значение придается процентному соотношению отдельных форм лейкоцитов, то есть лейкоцитарной формуле.

Лейкоцитарная формула крови здорового человека:

Относительное количество Абсолютное количество

Базофилы……………………….0-1% 0-0,0650 х 10⁹/л

Эозинофилы…………………….0.5-5% 0,02-0,30 х 10⁹/л

Нейтрофилы: - миелоциты…………0% отсутствуют

- метамиелоциты……0% отсутствуют

- палочкоядерные…...1-6% 0,040-0,300 х 10⁹/л

- сегментоядерные….47-72% 2,0-5,5 х 10⁹/л

Лимфоциты……………………….19-37% 1,2-3,0 х 10⁹/л

Моноциты………………………….3-11% 0,09-0,6 х 10⁹/л

Подсчет лейкоцитарной формулы производят в окрашенных мазках периферической крови. Для правильной интерпрепатации результатов исследования лейкоцитарной формулы рекомендуется производить подсчет в абсолютных количествах, а не в относительных. Наиболее распространены методы окраски мазков по Романовскому-Гимзе, по Паппенгейму. Под иммерсией считают не менее 200 клеток, а затем выводят процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов. Анализ лейкограммы с учетом других показателей крови и клинической картины является ценным методом обследования, помогает в постановке диагноза и определении прогноза заболевания.

Основные причины нейтрофилеза.

1. Острые бактериальные инфекции – локализированные и генерализованные.

2. Воспаление или некроз ткани.

3. Миелопролиферативные заболевания.

4. Интоксикация.

5. Лекарственные воздействия (кортикостероиды).

6. Острые кровотечения.

Основные причины нейтропении.

1. Инфекции – бактериальные (брюшной тиф, бруцеллез, туляремия, паратифы) и вирусные (инфекционный гепатит, корь, грипп, краснуха и другие).

2. Миелотоксические влияния и супрессия гранулоцитопоэза (ионизирующая радиация; химические агенты – бензол, анилин, ДДТ; лекарственные воздействия – цитостатики и иммунодепрессанты; витамин-В₁₂-фолиеводефицитная анемия, острый алейкемический лейкоз, апластическая анемия).

3. Воздействие антител (иммунные формы) – гиперчувтвительность к медикаментам, аутоиммунные заболевания (СКВ, ревматоидный артрит, хронический лимфолейкоз), изоиммунные проявления (гемолитическая болезнь новорожденных).

4. Перераспределение и депонирование в органах – шоковые состояния, заболевания со спленомегалией и гиперспленизмом.

5. Наследственные формы (семейная доброкачественная хроническая нейтропения).

Основные причины эозинофилии.

1. Аллергические заболевания.

2. Паразитарные инвазии (трихинеллез).

3. Хронические поражения кожи - псориаз, пузырчатка, экзема.

4. Опухоли (эозинофильные варианты лейкоза).

5. Другие заболевания – фибропластический эндокардит Леффлера, скарлатина.

6. В фазе выздоровления при инфекциях и воспалительных заболеваниях (благоприятный прогностический признак).

Причины эозинопении (анэозинофилии).

1. Повышенная адренокортикостероидная активность в организме.

2. Брюшной тиф.

Основные причины базофилии:

1. Хронический миелолейкоз и эритремия.

Основные причины моноцитоза.

1. Подострые и хронические бактериальные инфекции.

2. Паразитарные инфекции – лейшманиоз, малярия.

3. Гемобластозы – моноцитарный лейкоз, лимфогранулематоз, лимфомы.

4. Другие состояния – СКВ, саркоидоз, ревматоидный артрит, инфекционный моноцитоз; в период выздоровления от инфекций, при выходе из агранулоцитоза, после спленэктомии.

Снижение числа моноцитов имеет значение главным образом при оценке лимфоцитарно-моноцитарного соотношения при легочном туберкулезе.

Основные причины лимфоцитоза.

1. Инфекции – острые вирусные (инфекционный мононуклеоз, корь, краснуха, ветряная оспа), хронические бактериальные (туберкулез, сифилис, бруцеллез), протозойные (токсоплазмоз).

2. Гемобластозы (лимфолейкоз, лимфомы).

3. Другие заболевания - гипертиреоз, аддисонова болезнь, витамин-В₁₂-фолиево-дефицитная анемия, гипо- и апластические анемии.

Лимфоцитопения наблюдается при СКВ, лимфогранулематозе, распространенном туберкулезе лимфоузлов, в терминальной стадии почечной недостаточности, острой лучевой болезни, иммунодефицитных состояниях, приеме глюкокортикоидов.

Увеличение или уменьшение числа отдельных видов лейкоцитов в крови может быть относительным или абсолютным. Если изменяется только процентное содержание того или иного вида лейкоцитов, то имеет место относительная нейтрофилия, относительная эозинопения и т.д. Увеличение или уменьшение абсолютного содержания какого-либо вида лейкоцитов, то есть количества данных клеток в единице объема крови, называют абсолютной нейтрофилией, абсолютной эозинопенией и т.д.

Сдвиг формулы влево (увеличение количества молодых форм нейтрофилов) – признак воспаления или некротического процесса в организме.

Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо характерен для лучевой болезни и витамин-В₁₂-фолиеводефицитной анемии.

Отсутствие или значительное снижение числа всех видов зернистых лейкоцитов – гранулоцитов (нейтрофилов, эозинофилов, базофилов) обозначают термином агранулоцитоз. В зависимости от механизма возникновения различают миелотоксический (воздействие ионизирующего излучения, прием цитостатиков) и иммунный (гаптеновый и аутоиммунный агранулоцитоз).

5. Методика определения количество тромбоцитов. Диагностическая трактовка.

Существуют следующие методы определения количества тромбоцитов в единице объема крови:

1) методика Фонио;

2) подсчет в камере Бюркера с сеткой Горяева;

3) использование фазоконтрастной и люминисцентной микроскопии;

4) электронно-автоматический метод (счетчики «Культер», «Целлоскоп»).

Для подсчета тромбоцитов периферической крови ча­ще всего применяют методику Фонио.

Оборудование и реактивы:

1) 14% раствор магния сульфата.

Ход исследования: для предупреждения склеивания тромбоцитов предварительно на место укола пальца нано­сят каплю 0,14 % раствора магния сульфата и через нее де­лают прокол. Выступившую каплю крови смешивают с каплей магния сульфата и делают мазок, который окра­шивают по Романовскому—Гимзе. Затем в мазке под мик­роскопом с иммерсионной системой одновременно подсчи­тывают 1000 эритроцитов и находящиеся среди них тром­боциты. Последние встречаются в препарате либо в оди­ночку, либо чаще разбросаны кучками между эритроцита­ми. По величине тромбоцит занимает приблизительно 1/3-1/4 эритроцита. Тромбоциты не имеют ядра и их ци­топлазма окрашена в синеватый цвет с красноватым от­тенком в центре. Зная содержание эритроцитов в 1 л кро­ви, легко вычисляют абсолютное количество тромбоцитов.

Нормальное количество тромбоцитов в периферической крови: 180.0 – 320.0 х 10⁹/л. (150-450 х 10⁹/л согласно рекомендациям ВОЗ).

Интерпретация полученных данных.

Причины увеличения числа тромбоцитов (тромбоцитоза).

1. Миелопролиферативные заболевания - хронический миелолейкоз, эритремия, эссенциальная тромбоцитемия.

2. Воспалительные процессы – острая ревматическая лихорадка, ревматоидный артрит и др.

3. Злокачественные опухоли - лимфогранулематоз, рак.

4. Острая кровопотеря и гемолитические анемии.

5. Спленэктомия.

Причины уменьшения количества тромбоцитов (тромбоцитопении).

1. Врожденные (синдром Вискотта-Олдрича и др.) и приобретенные (идиопатическая иммунная тромбоцитопеническая пурпура, СКВ и др.), иммунодефициты.

2. Апластическая, витамин-В₁₂-фолиеводефицитная, тяжелая железодефицитная анемии.

3. ДВС-синдром, гемангиомы.

4. Вирусные инфекции, риккетсиозы, малярия.

5. Гиперспленизм.

6. «Синие» врожденные пороки сердца, застойная сердечная недостаточность.

7. Лучевая болезнь.

8. Лекарственные воздействия (цитостатики).

6. Методика сбора мокроты.

Мокротой называется патологический секрет, выделяемый с кашлем из дыхательных путей. Мокрота собирается в чистую широкогорлую стеклянную посуду с закручивающейся крышкой в утренние часы при кашле, после тщательного полоскания рта и горла, до приема пищи. Собирать мокроту за сутки и больше нецелесообразно, так как длительное стояние ведет к размножению флоры и аутолизу клеточных элементов. При необходимости мокроту сохраняют в прохладном месте (в холодильнике).

Источником наиболее ценной информации является содержимое трахеобронхиального дерева, полученное при бронхоскопии (промывные воды бронхов).

7. Исследование мокроты: макроскопическое, микроскопическое, бактериоскопическое. Понятие о бактериологическом методе исследования мокроты.

При макроскопическом изучении обращают внимание на: характер мокроты, количество, цвет, запах, консистенцию, слоистость, наличие различные включений.

Характер мокроты определяется ее составом.

Слизистая – состоит из слизи (продукта слизистых желез дыхательных путей). Выделяется при острых бронхитах, разрешении приступа бронхиальной астмы.

Слизисто-гнойная – представляет смесь слизи и гноя, причем слизь преобладает, а гной включен в виде комочков или прожилок. Наблюдается при хронических бронхитах, бронхопневмонии.

Гнойно-слизистая – содержит слизь и гной (преобладание гноя, слизь имеет вид тяжей). Характерна для хронических бронхитов, бронхоэктазии, абсцедирующей пневмонии.

Гнойная – не имеет примеси слизи и появляется в случае открытого в бронх абсцесса легкого, при прорыве эмпиемы плевры в бронх.

Слизисто-кровянистая – состоит из слизи с прожилками крови или кровяного пигмента. Отмечается при катарах верхних дыхательных путей, бронхогенном раке, пневмонии.

Слизисто-гнойно-кровянистая – содержит слизь, гной и кровь, чаще равномерно перемешанные между собой. Появляется при бронхоэктазах, туберкулезе, актиномикозе легких, бронхогенном раке.

Кровавое отделяемое (кровохаркание) – встречается при туберкулезе, опухолях бронхов и легкого, ранении легкого, актиномикозе.

Серозное отделяемое – характерно для отека легких, представляет собой пропотевшую в полость бронхов плазму крови.

Количество мокроты (величина отдельных порций и суточные количества) зависят от характера заболевания и от способности больного к отхаркиванию.

Скудное количество мокроты – характерно для воспаления дыхательных путей (трахеит, острый бронхит в начальной стадии, бронхиальная астма, бронхопневмония).

Обильное количество мокроты (от 0.5 до 2 л) выделяется обычно из полостей легочной ткани, бронхов (бронхоэктатическая болезнь, абсцесс легкого, прорыв эмпиемы), при повышенном кровенаполнении легких и пропотевании в легкие и бронхи большого количества плазмы крови (отек легких).

Цвет и прозрачность мокроты зависят от ее характера и от состава вдыхаемых частиц.

Слизистая мокрота – стекловидная, прозрачная; слизисто-гнойная – стекловидная с желтым оттенком; гнойно-слизистая – желто-зеленоватая; гнойная – желто-зеленая; слизисто-кровянистая – стекловидная с кровянистым или ржавым оттенком; слизисто-гнойно-кровянистая – стекловидная с желтыми комочками, прожилками красного цвета или ржавыми оттенками; отделяемое при легочном кровотечении – жидкое, красного цвета, пенистое; при распаде опухоли легкого может наблюдаться мокрота в виде «малинового желе»; отделяемое при отеке легких – жидкое, прозрачно-желтое с опалесценцией, пенистое и клейкое.

Мокрота с инородными примесями имеет цвет этих примесей: белая у мукомолов, черная у шахтеров и др.

Запах у мокроты появляется при длительном стоянии, а также при задержке мокроты в бронхах или полостях в легком и обусловлен деятельностью бактерий, вызывающих гнилостный распад белков. Свежевыделенная мокрота обычно не имеет запаха. Мокрота имеет неприятный запах при бронхоэктатической болезни, абсцессе легкого, туберкулезе, злокачественных новообразованиях с некрозом; зловонный (гнилостный) запах отмечается при гангрене легкого.

Консистенция тесно связана с характером мокроты и может быть вязкой, густой и жидкой. Вязкость зависит от содержания слизи и от количества форменных элементов - лейкоцитов, эпителия. Наиболее вязкая мокрота обнаруживается при муковисцидозе и бронхиальной астме.

Слоистость мокроты. При бронхоэктазах, гнилостном бронхите, абсцессе и гангрене легкого мокрота при стоянии разделяется на три слоя: на дне посуды находятся тяжелые элементы мокроты – гной и детрит, образующийся вследствие распада легочной ткани; средний слой составляет серозная жидкость; в верхнем – плавающие частицы, содержащие воздух и слизь.

Включения, патологические элементы, паразиты в мокроте обнаруживают путем ее рассмотрения в чашке Петри на белом или черном фоне, используя лупу.

В мокроте можно выявить:

1) спирали Куршмана – штопорообразно извитые трубчатые тела, имеющие диагностическое значение при бронхиальной астме;

2) фибринозные свертки – древовидно разветвленные образования эластичной консистенции, имеющие значение при фибринозном бронхите, реже - при крупозной пневмонии;

3) рисовидные тельца (линзы Коха) – плотные образования творожистой консистенции, состоящие из детрита, туберкулезных палочек и эластических волокон; обнаруживаются при кавернозном туберкулезе легких;

4) гнойные пробки Дитриха – состоят из детрита, бактерий, кристаллов жирных кислот, встречаются при гангрене легкого;

5) дифтеритические пленки;

6) некротизированные кусочки легкого;

7) частицы опухоли легкого;

8) друзы актиномицетов;

9) элементы эхинококка;

10) случайно попавшие из полости инородные тела (семена подсолнечника и др.).

Микроскопическое исследование мокроты.

Микроскопическое исследование мокроты проводят в свежих неокрашенных и фиксированных окрашенных препаратах.

Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три основные группы.

1. Клеточные элементы – плоский эпителий (одиночные клетки встречаются всегда, множественные – при воспалительных явлениях в ротовой полости); цилиндрический эпителий (встречается при остром катаре верхних дыхательных путей, остром бронхите, бронхиальной астме); макрофаги «жировые шары» (встречаются при раке легкого, туберкулезе, актиномикозе), сидерофаги – «клетки сердечных пороков», макрофаги с гемосидерином (обнаруживают при застое в малом круге кровообращения, при инфаркте легкого), кониофаги – пылевые макрофаги (характерны для пневмокониозов и пылевых бронхитов); опухолевые клетки; лейкоциты (в слизистой мокроте – единичные, в гнойной – покрывают все поля зрения); эритроциты (единичные могут быть в любой мокроте, окрашенной кровью).

2. Волокнистые образования – эластические волокна, которые указывают на распад легочной ткани при туберкулезе, абсцессе, опухоли, коралловые волокна (отложение на эластичном волокне жирных кислот и мыл) и обызвествленные волокна (пропитанные солями извести); фибринозные волокна (при фибринозном бронхите, крупозной пневмонии, иногда при актиномикозе); спирали Куршмана.

3. Кристаллические образования – кристаллы Шарко-Лейдена (продукт кристаллизации белков распавшихся эозинофилов, встречается при бронхиальной астме, глистных поражений легких), кристаллы гематоидина (обнаруживаются при кровоизлияниях в легочную ткань, в некротизированной ткани), кристаллы холестерина (встречаются при задержке мокроты в полостях – туберкулез, абсцесс, эхинококкоз); кристаллы жирных кислот – также образуются при застое мокроты в полостях легкого.

Окраску препаратов производят с целью изучения клеток крови в мокроте и для бактериологического исследования.

Для изучения клеток крови в мокроте применяют способ окрашивания по Романовскому-Гимзе. При этом способе окраски удается дифференцировать клетки лейкоцитарного ряда, эритроциты, однако, наибольшее значение имеет выделение эозинофилов (эозинофилия мокроты свойственна для бронхиальной астмы, глистного поражения легких, эозинофильной пневмонии).

Бактериоскопическое исследование мокроты с окраской по Грамму имеет ориентировочное значение для выявления грамм-положительной и грамм- отрицательной микрофлоры. Окраска по Цилю-Нильсену производится с целью обнаружения микобактерий туберкулеза.

В случае, когда при бактериоскопии из-за малого количества микобактерий туберкулеза обнаружить из не удается, прибегают к ряду дополнительных исследований (люминесцентная микроскопия, методы накопления бактерий – флотация и электрофорез).

Иногда в окрашенном препарате можно выявить различные виды грибов – аспергиллы, кандиды, актиномицеты.

Бактериологическое исследование мокроты.

Бактериологический метод позволяет выделить возбудителя заболевания в чистом виде при посеве мокроты на питательные среды, определить вирулентность и лекарственную устойчивость (чувствительность) выделенного микроорганизма, что необходимо для рационального подбора антибактериальных средств. В некоторых случаях производят заражение экспериментальных животных мокротой, полученной от больного человека.

8. Техника проведения плевральной пункции.

Выпотные жидкости, скапливающиеся в различных полостях тела (плевральной, брюшной, перикардиальной), извлекают с помощью пункции этих полостей.

Пункцию плевральной полости чаще проводят в 7 или 8 межреберье по заднеподмышечной линии (при более высоком проколе эвакуировать жидкость полностью невозможно, а при более низком - возникает опасность попадания в брюшную полость и повреждения ее органов), по верхнему краю нижележащего ребра (чтобы не повредить сосудисто-нервный пучок, проходящий по нижнему краю верхнего ребра). Предварительно перкуторно и рентгенологически (эхоскопически) определяют верхнюю границу выпота.

В лабораторию доставляют всю эвакуированную жидкость, если ее получено менее 1 литра. При большом объеме (более 1 литра) доставляют последнюю литровую порцию, так как она наиболее богата клеточными элементами.

После извлечения жидкости в плевральную полость можно ввести необходимое лекарственное средство.

9. Лабораторное исследование плевральной жидкости: макроскопический, микроскопический, физико-химический и бактериологический анализ. Методика проведения проб Ривальта и Лукерини. Отличительные признаки экссудата и транссудата.

При макроскопическом исследовании определяют характер, цвет, прозрачность, запах жидкости.

По характеру полостные жидкости, в т.ч. и плевральный выпот, делят на две группы – транссудаты и экссудаты. Транссудаты (невоспалительные жидкости) образуются при повышении венозного давления в сосудах, нарушении обмена электролитов и белков, увеличении продукции альдостерона и некоторых других состояниях.

Экссудаты (жидкости воспалительного характера) бывают:

1) серозные (туберкулез, острая ревматическая лихорадка, СКВ);

2) серозно-фибринозные (плевропневмония, туберкулез);

3) фибринозные (плевропневмония);

4) серозно-гнойные (выпотной плеврит, плевропневмония);

5) гнойные (эмпиема плевры);

6) гнилостные (присоединение гнилостной флоры);

7) геморрагические (опухоли, инфаркт легкого, туберкулез);

8) хилезные и хилезоподобные (травма грудного лимфатического протока, хроническое воспаление плевры);

9) холестериновые (застарелые осумкованные выпоты, чаще туберкулезного генеза).

Цвет и прозрачность плевральной жидкости зависит от ее характера. Транссудаты и серозные экссудаты имеют светло-желтый цвет, прозрачные, слегка опалесцируют. Остальные виды экссудатов в большинстве случаев мутные, различной окраски (гнойный - зеленовато-желтый цвет, геморрагический – от розового до темно-бурого цвета, гнилостный – коричневый, серый, хилезные – цвета молока и т.д.).

Неприятный, зловонный запах характерен для гнилостного экссудата, который наблюдается при гангрене легкого.

Микроскопическое исследование. Микроскопическое исследование позволяет детально изучить клеточный состав пунктата. Цитологическому анализу подвергают препараты, полученные из осадка после центрифугирования плевральной жидкости. До окраски препараты изучают в нативном виде.

В нативном препарате можно обнаружить следующие элементы.

1. Эритроциты – в транссудатах и серозных экссудатах выявляются в небольшом количестве, в геморрагических экссудатах – покрывают все поля зрения.

2. Лейкоциты – в транссудатах до 15-20 в поле зрения, в экссудатах – в большом количестве.

3. Мезотелиоциты – в большом количестве обнаруживаются при воспалительных процессах; группами – в транссудате большой давности; в виде синцитиального образования – при мезотеломе плевры.

4. Опухолевые клетки – при поражении серозной оболочки злокачественными опухалями.

5. Жировые капли – встречаются в гнойных экссудатах с клеточным распадом и в большом количестве - в хилезном экссудате.

6. Кристаллы холестерина – обнаруживаются в старых осумкованных выпотах, чаще туберкулезной этиологии.

Окраску препаратов после фиксации мазков проводят обычными гематологическими методами (по Романовскому-Гимзе). В окрашенным препаратах нейтрофилы преобладают в гнойном экссудате, а лимфоциты (до 80-90%) – в серозном. Эозинофилы содержатся в экссудате ревматической, туберкулезной, опухолевой этиологии, при аллергических реакциях.

Бактериоскопия мазков, окрашенных по Грамму, может выявить гноеродную или иную неспецифическую флору, содержащуюся в плевральной жидкости. В серозном экссудате туберкулезной этиологии бактериоскопически обнаружить микобактерии обычно не удается, но посев на питательной среде или прививка пунктата морским свинкам дает иногда положительный результат. Посев жидкости на питательную среду необходим для выделения культуры инфекционного агента, определения его чувствительность к антибиотикам с целью рациональной терапии.

Физико-химический анализ плевральной жидкости имеет целью определение относительной плотности, так как она являются одним из основных критериев при различении экссудатов и транссудатов.

Относительную плотность плевральной жидкости определяют ареометром. Относительная плотность транссудата колеблется от 1.005 до 1.015, относительная плотность экссудата обычно выше 1.015.

Для определения содержания белка в плевральной жидкости предложены различные методы: биуретовый, гравиметрический, нефелометрический и др. Наиболее удобен рефрактометрический метод. В транссудате содержатся менее 30 г/л белка, в экссудате – более 30 г/л. Имеет значение и качественный состав белков. Соотношение альбуминов и глобулинов в транссудате, т.е. альбуминово-глобулиновый коэффициент – 2.5-4, в экссудате – 0.5-2.

Нередко для дифференцирования транссудатов и экссудатов выполняют дополнительные качественные пробы, основанные на осаждении особого вещества белковой (глобулиновой) природы – серозомуцина, который содержится в экссудатах, но отсутствует или имеется лишь в виде следов в транссудатах.

Проба Ривальта – в цилиндр наливают 100 мл дистиллированной воды, подкисляют 2-3 каплями ледяной уксусной кислоты и добавляют по каплям исследуемую жидкость. Капли экссудата, опускаясь на дно сосуда, оставляют за собой мутный след. Капли транссудата не оставляют следа. Причина образования помутнения – наличие в экссудате серозомуцина, свертывающегося под влиянием уксусной кислоты.

Проба Лукерини - к 2 мл 3% раствора перекиси водорода на предметном стекле, на черном фоне прибавляют каплю пунктата. В случае экссудата появляется опалесцирующее помутнение, указывающее на наличие серозомуцина.

Диагностические признаки экссудата.

1. Относительная плотность выше 1.015.

2. Концентрация белка более 30 г/л.

3. Альбумино-глобулиновый коэффициент 0.5-2.

4. Пробы на серозомуцин положительные.

5. Клеточный состав при микроскопии: выраженный цитоз, число лейкоцитов больше 20 в поле зрения.

Диагностические признаки транссудата.

1. Относительная плотность менее 1.015.

2. Концентрация белка менее 30 г/л.

3. Альбумино-глобулиновый коэффициент 2.5-4.

4. Пробы на серозомуцин отрицательные.

5. Клеточный состав скудный, преобладают клетки мезотелия, лейкоцитов до 10-15 в поле зрения.

10. Бронхоскопия. Методика проведения. Понятие о биопсии бронхов и легких.

Бронхоскопия - исследование нижних дыхательных путей с помощью бронхоскопа, включающее осмотр трахеи и бронхов, выполнение различных диагностических и лечебных манипуляций. Выделяют 2 вида бронхоскопии: с применением жесткого и гибкого (фибробронхоскопия) бронхоскопов.

Жесткая бронхоскопия – обычно выполняется под наркозом.

Показания:

- инородные тела бронхов и бронхолитиаз,

- легочное кровотечение.

Фибробронхоскопию производят под местной анестезией с введением бронхоскопа трансназально или через ротовую полость.

Осмотр через бронхоскоп позволяет выявить анатомические особенности, признаки эндобронхиального роста опухоли, стенозы трахеи и бронхов, симптомы туберкулеза бронхов, бронхитов, рубцовые изменения, признаки кровотечения, свищи и т.д. Позволяет произвести забор содержимого или промывных вод бронхов для бактериологического, цитологического исследования, выполнить биопсию бронхов, применить лаваж.

Бронхоскопия – эффективный способ лечения нагноительных заболеваний легких, обеспечивающий санацию бронхиального дерева путем аспирации гнойного содержимого и эндобронхиального введения лекарственных веществ, дает возможность извлечь инородное тело бронха.

Показания.

1. Клинические:

- немотивированные длительные более 14 дней кашель и одышка;

- кровотечение, кровохарканье.

2. Рентгенологические:

- локализация патологических изменений вблизи корня легкого;

- диссеминация неясной этиологии;

- синдромы локального нарушения бронхиальной проходимости (гиповентиляция, ателектаз);

- изменение размеров полостных образований за короткий срок.

3. Перед операцией на органах дыхания.

Понятие о биопсии бронхов и легких.

Биопсия (открытая, хирургическая, инцизионная) – диагностическое вмешательство заключающееся в торакотомии с последующей резекцией участков измененной легочной ткани с целью патоморфологической верификацией диагноза.

Показания:

- диссеминированные легочные процессы неизвестной этиологии,

- увеличение лимфатических узлов корня легкого и средостения неизвестной этиологии.

Преимущества метода. Возможность получить достаточный по объему биоптат из предварительно выбранного участка с явными макроскопическими изменениями. Информативность метода 90%.

Чрезбронхиальная биопсия - позволяет с помощью вводимых бронхиальных щипцов получить для гистологического исследования ткань периферических образований, прилежащих к стенке бронха.

Показания:

- дифференциальная диагностика периферического новообразования и ограниченного воспалительного очага,

- уточнение характера диссеминированного процесса.

Трансторокальная биопсия – это метод, позволяющий путем пункции образований легких и плевры через грудную клетку получить материал для цитологического и гистологического исследования.

Показания:

- периферически расположенное круглое образование,

- густая диссеминация с деструкцией и обтурацией бронхов.

Плевроскопия, плевробиопсия – осмотр плевральной полости с помощью торакоскопа.

Показания:

- экссудативный плеврит неясной этиологии,

- опухоли и другие повреждения плевры,

- рецидивирующий спонтанный пневмоторакс.

Меадиностиноскопия, медиастинотомия – осмотр переднего средостения с помощью торакоскопа.

Показания:

- внутригрудные аденопатии (увеличение лимфатических узлов),

- неясной природы диссеминация легких, когда трахеобронхиальная пункция оказалась неинформативной,

- густая диссеминация легких.

6. Вопросы для самоконтроля знаний.

Задания для тестового контроля.

1. Признаками гиперхромной анемии являются:

1) увеличение цветового показателя;

2) макроцитоз;

3) ретикулоцитоз;

4) снижение цветового показателя;

5) микроцитоз.

Верно: А - 1, 2. Б - 1, 5. В - 3, 6. Г - 4, 5. Д - 2, 4.

2. Базофилия крови наблюдается при:

1) эритремии;

2) пневмонии;

3) гипотиреозе;

4) лучевой болезни;

5) хроническом миелолейкозе.

Верно: А - 1, 5. Б - 2, 4. В - 2, 3, 5. Г - 1, 3, 4. Д - все ответы.

3. При исследовании мокроты больных бронхиальной астмой выявляют:

1) эластические волокна;

2) спирали Куршмана;

3) «чечевицы»;

4) кристаллы Шарко-Лейдена;

5) эозинофилы;

6) сидерофаги.

Верно: А - 2, 4, 5. Б - 2, 3, 6. В - 1, 3, 6. Г - 3, 5, 6. Д - 2, 3, 6.

4. Обнаружение эластических волокон в мокроте является признаком:

а) фибринозного воспаления легких;

б) снижения эластичности легких;

в) распада легочной ткани;

г) гнойного бронхита;

д) бронхо-плеврального свища.

5. Хилезный плевральный экссудат является признаком:

а) туберкулеза плевры;

б) парапневмонического плеврита;

в) лимфостаза;

г) повреждения грудного лимфатического протока;

---

<== предыдущая страница	|	следующая страница ==>
Волокнистые соединительные ткани	|	Ширина шва

---

Дата добавления: 2014-11-24; просмотров: 706; Нарушение авторских прав

---

Поделиться с ДРУЗЬЯМИ:

Мы поможем в написании ваших работ!