Студопедия

Главная страница Случайная лекция


Мы поможем в написании ваших работ!

Порталы:

БиологияВойнаГеографияИнформатикаИскусствоИсторияКультураЛингвистикаМатематикаМедицинаОхрана трудаПолитикаПравоПсихологияРелигияТехникаФизикаФилософияЭкономика



Мы поможем в написании ваших работ!




Лабораторная работа. Определение активности каталазы

Читайте также:
  1. I. ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОТЕХНОЛОГИИ КАК НАУКИ И ЕЕ ПРЕДМЕТА ИЗУЧЕНИЯ.
  2. Быстрое определение направлений
  3. Быстрое определение расстояний
  4. Введение в экспертные системы. Определение и структура
  5. ВИДЫ РЕАКТИВНОСТИ И РЕЗИСТЕНТНОСТИ
  6. Возникновения понятия экологии и его определение
  7. Второй этап это определение целей мегапроектов.
  8. Выбор типа весов и определение потребности в них
  9. Выбор типа, определение потребности в установках для интенсификации твердения бетона в изделиях, обоснование режима их работы
  10. Выявление приоритетных конкурентов и определение силы их позиции

Принцип метода:молибденовокислый аммоний с раствором перекиси водорода образует комплексное соединение желтого цвета. Каталаза разрушает перекись водорода по следующей формуле:

2О2 = 2Н 2О + О 2

Степень снижения интенсивности окраски раствора пропорциональна активности каталазы.

Ход работы: в опытную и контрольную пробирку вносят по 4 мл 0,03% раствора перекиси водорода, в опытную пробирку добавляют 0,2 мл гемолизированной крови ( разведение 1:1000). Ингибируют пробу 20 минут при 370 С. Затем в обе пробирки вносят по 2 мл раствора молибдата аммония, а в контрольную – дополнительно 0,2 мл гемолизата. Перемешивают. Измеряют оптическую плотность опытной и контрольной пробы против воды при синем светофильтре. Определяют активность каталазы по формуле:

( Е к – Е 0) . 5600

А= -------------------, где

В

А –активность каталазы (мкмоль Н 2О 2/ мин на мл крови);

Е к –экстинция контроля; Е 0 – экстинция опыта;

В – время инкубации, мин; 5600 – коэффициент

В норме активность каталазы составляет 135 мкмоль Н 2О 2/ мин на мл

крови (в слюне –12-16 мкмоль). Активность каталазы в крови может снижаться при анемии, опухолевом росте, туберкулезе, некоторых других заболеваниях, а повышаться при острых воспалительных процессах ( в слюне – при воспалительных процессах слизистой ротовой полости).

Аргументировано и кратко ответить на следующее:

1. Может ли осуществиться окисление СН3 - СН2 - СН2 - ОН ®

СН3 - СН2 - СН = О в бескислородной среде? Какие условия для этого необходимы? Написать схему реакции.

2. Может ли и при каком условии в бескислородной среде произойти окисление по типу СН3 - СН2 - СН = О ® СН3 - СН2 – СООН? Укажите необходимые компоненты, составьте схему реакции. Как пояснить появление двух атомов кислорода в продукте реакции.

3. Является ли кислород исключительным (единственным) конечным акцептором водорода в цепи тканевого дыхания и вообще в биологическом окислении?

4. Почему окисление в живой природе отождествляли с горением вне организма? Назовите внешние признаки сходства между горением и процессом окисления в организме. Назовите отличия между этими процессами.

5. Соединения А.В,С, Д, Р имеют соответственно редокс-потенциалы, равные –0,39; +0,22; - 0,37; - 0,35; +0,28. В какой последовательности будет происходить перенос электронов в системе, включающей эти соединения (от водородного электрода)?

5. Напишите реакции дегидрирования соединений:

R-СН2 –СН2 - R; R-СН=О; R- СНОН -R; R-СН=СН-R

6. Какие из перечисленных соединений являются субстратами флавиновых ферментов: глюкоза, сахароза; янтарная кислота; глицериновый альдегид, НАДН +.

8. В эксперименте к смеси митохондриальных дыхательных ферментов и их субстрата добавили ингибитор НАД-зависимой дегидрогеназы (сохранена функция других ферментов). Как это отразится на коэффициенте полезного действия тканевого дыхания и теплопродукции.

 


<== предыдущая страница | следующая страница ==>
Занятие 10. Введение в обмен веществ и энергии. Биологическое окисление | Занятие 11-12. Окислительное фосфорилирование

Дата добавления: 2014-10-14; просмотров: 592; Нарушение авторских прав




Мы поможем в написании ваших работ!
lektsiopedia.org - Лекциопедия - 2013 год. | Страница сгенерирована за: 0.008 сек.